Bence-Jones-protein

Urinen til en frisk person inneholder ikke Bence-Jones-protein, som er representert av lette kjeder av immunoglobuliner som oppdages som et resultat av dannelsen av ondartede tumorprosesser.

Laboratorietester for tilstedeværelsen av spesifikke lavmolekylære proteiner er nødvendige for å diagnostisere en rekke patologiske tilstander (oftest problemer med β-immunsystemet), samt for å bestemme effektiviteten av den brukte terapien.

I overskudd produseres Bence-Jones-protein av plasmaceller, beveger seg med blodet og skilles ut gjennom vannlating. Det er denne sistnevnte egenskapen til proteinlegemer som gjør at man kan mistenke følgende sykdommer ved urinundersøkelse:

• myelom;
• osteosarkom;
• plasmacytom;
• kronisk lymfatisk leukemi;
• lymfogranulomatose;
• primær amyloidose;
• makroglobulinemi;
• idiapatisk monoklonal gammopati.

Sammenhengen mellom frigjøring av et spesifikt protein og påfølgende nyredysfunksjon forårsaket av proteinlegemers toksiske effekt på epitelstrukturene i nyretubuli, som igjen forårsaker fenomenet dystrofi, Fanconis syndrom og renal amyloidose, er klinisk bekreftet.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ]

Bence Jones-protein i urinen

Tilstedeværelsen av protein i urinen kalles proteinuri. Prerenal proteinuri forstås som tilstedeværelsen av en stor mengde lavmolekylært protein i urinen. I dette tilfellet er det ingen skade på nyrefilteret og tubuli, og normal nyrefunksjon er ikke i stand til å sikre reabsorpsjon av proteinlegemer. Ekstrarenal (falsk) proteinuri, dvs. at det oppstår uten nedsatt nyrefunksjon, indikerer tilstedeværelsen av en infeksiøs eller ondartet prosess i kroppen. Proteinuri observeres hos 60–90 % av tilfellene hos pasienter med myelomatose. Omtrent 20 % av patologiske tilstander er Bence-Jones myelomatose.

Bence-Jones-protein i urin differensieres på grunn av humorale endringer i β-immunsystemet. Forekomsten av proteinlegemer er assosiert med myelomatose, paraproteinemiske hemoblastoser, endoteliose, Waldenströms makroglobulinemi, lymfatisk leukemi og osteosarkom. Påvisning av Bence-Jones-protein i urin er et viktig diagnostisk og prognostisk trinn. På grunn av sin lave molekylvekt skilles Bence-Jones-protein ut i urinen, noe som skader epitelet i nyretubuli, noe som er belastet med utvikling av nyresvikt, som kan føre til død. Rettidig klassifisering av proteinet i henhold til type er også viktig: λ-protein har en større nefrotoksisk effekt enn κ.

[ 10 ], [ 11 ], [ 12 ], [ 13 ], [ 14 ]

Bence Jones proteinanalyse

Tilstedeværelsen av andre proteinlegemer enn serum i urinen indikerer lymfatisk leukemi, osteosarkom eller myelom (tumorprosesser i benmargen). Bence-Jones-proteinet, når urinfiltratet varmes opp til 45–60 º C, utfelles som et grumsete sediment som legger seg på veggene i reagensrøret. En ytterligere økning i temperatur til kokeverdier løser opp den utskilte grumsetheten.

Den kvantitative analysen for Bence Jones-protein utføres som følger:

• bruk av delvis vann og delvis salpetersyre som reagens;
• plassering av salpetersyre (0,5–1 ml) i et reagensrør med lag av samme mengde urin som skal testes;
• evaluering av resultatet etter 2 minutter (utseendet til en tynn ring ved grensen av flytende medium indikerer tilstedeværelsen av 0,033 % proteinlegemer).

Observasjon av en trådlignende ring krever fortynning av urinen med vann i forholdet 1:1, utseendet til en tykk ring indikerer behovet for å blande en del av urinen med tre deler vann, og i tilfelle en kompakt ring fortynnes en del av urinen med syv porsjoner vann. Videre fortsetter fortynningen til det karakteristiske sedimentet dukker opp i løpet av det 2-3. minuttet av testen.

Mengden protein som inngår beregnes ved å multiplisere 0,033 % med fortynningsverdien. For eksempel, hvis urinen ble fortynnet 10 ganger, dukket ringen av proteinlegemer opp på slutten av studiens tredje minutt, og deretter beregnes prosentandelen proteininnhold som følger: 0,033x10=0,33.

Hvis det ikke er noe sediment, vurderes graden av turbiditet - uttalte, svake eller knapt synlige spor av turbiditet.

[ 15 ], [ 16 ], [ 17 ], [ 18 ], [ 19 ]

Bence Jones proteinsekresjon

Avhengig av typen utskilt immunglobulin skilles det mellom:

• lettkjedepatologier (Bence Jones-proteinsekresjon);
• glomerulopati (sekresjon av andre immunglobuliner).

Ulike kombinasjoner av nyreskade er også mulige. Som praksis viser, er nefropati en konsekvens av lymfoproliferativ patologi (myelomatose, kronisk lymfatisk leukemi, Waldenstroms sykdom, etc.).

Når de slippes ut i blodet, som alle proteiner med en molekylvekt på opptil 40 kDa, passerer lette kjeder nyrefilteret og brytes deretter ned til oligopeptider og aminosyrer via lysosomer. Overskudd av lette kjeder fremkaller dysfunksjon i katabolismereaksjonen og mulig frigjøring av lysosomale enzymer, noe som medfører nekrose av rørformet vev. Proteinlegemer fører til manglende evne til å reabsorbere, og når monoklonale lette kjeder kombineres med Tamm-Horsfall-protein, dannes proteinsylindere i de distale tubuli.

Bence Jones-protein ved myelomatosesykdom

Multippelt myelom er en patologisk tilstand der kroppen produserer lette immunglobulinkjeder i stedet for fullverdige. Diagnose av sykdommen og overvåking av tilstanden utføres ved laboratorietesting av urin, som viser det kvantitative innholdet av proteinlegemer. Spesifikasjonen av myelom-subtypen er basert på analyse av blodserum. Kliniske tegn på sykdommen inkluderer: beinsmerter, vannlatingsdysfunksjon, hematomer av ukjent opprinnelse, væskeretensjon i kroppen.

Bence Jones-protein ved myelomatose påvises basert på standardtester som viser det kvantitative innholdet av proteinlegemer og vurderer graden av nyreskade. Identifisering av proteinet i urinen forklarer skaden på epitelet med sklerose av nyrestroma, som over tid danner nyresvikt – en vanlig dødsårsak som følge av myelomatoseskade (Bence Jones-protein tetter tubuli fullstendig og forhindrer vannlating).

Statistiske data indikerer at myelomatose er differensiert hos menn over 60 år, med en historie med genetisk predisposisjon, som lider av fedme og immunsuppresjon, og som også har vært eksponert for giftige og radioaktive stoffer.

[ 20 ], [ 21 ], [ 22 ], [ 23 ], [ 24 ]

Bestemmelse av Bence Jones-protein

For å differensiere et spesifikt protein utføres en laboratoriestudie av den gjennomsnittlige porsjonen morgenurin (et volum på minst 50 ml er nødvendig). Tilstedeværelsen av Bence-Jones-protein med bestemmelse av den kvantitative komponenten er mulig ved hjelp av immunfikseringsmetoden. Separasjon av proteiner skjer ved elektroforese med påfølgende immunfiksering ved bruk av spesielle serum. Når proteinet bindes med antistoffer av lette og tunge kjeder av immunglobuliner, dannes immunkomplekser, som vurderes ved farging.

Det skal bemerkes at selv den minimale proteinkonsentrasjonen detekteres på grunn av utfellingsreaksjonen med sulfosalicylsyre. Bence-Jones-protein bestemmes ved å kombinere filtrert urin (4 ml) med acetatbuffer (1 ml). Etterfølgende oppvarming til 60º C i et vannbad og holding i 15 minutter med en positiv prøve gir et karakteristisk sediment. Denne metoden regnes som den mest pålitelige. Et for surt eller alkalisk miljø og lav relativ tetthet av urin kan påvirke analyseresultatene negativt.

Forskningsmetoder der Bence-Jones-protein løses opp ved oppvarming til 100 º C eller utfelles igjen ved avkjøling er upålitelige, siden ikke alle proteinelementer har de tilsvarende egenskapene. Men bruk av indikatorpapir er fullstendig uegnet for å detektere Bence-Jones-protein.

[ 25 ], [ 26 ], [ 27 ], [ 28 ], [ 29 ], [ 30 ]