Mikroskopisk analyse av sputum

Mikroskopisk observasjon av native og det faste farget spyttprøver gjør det mulig for en detaljert undersøkelse av cellestrukturen, og en viss grad gjenspeiler innholdet i den patologiske prosess i lungene og bronkiene, dens aktivitet, for å identifisere de ulike fiber og krystallinsk formasjon, har også viktig diagnostisk verdi, og til slutt omtrent vurdere tilstanden mikrobiell flora i luftveiene (bakterioskopi).

Ved en mikroskopi bruk innfødte og malte preparater av en sputum. For å studere den mikrobielle floraen (bakterioskopi) er sputumfargene vanligvis farget av Romanovsky-Giemsa, ifølge Gram, og for påvisning av Mycobacterium tuberculosis, men Cilu-Nielsen.

Cellulære elementer og elastiske fibre

Av de cellulære elementene som kan oppdages i sputum hos pasienter med lungebetennelse, er epitelceller, alveolære makrofager, leukocytter og erytrocytter av diagnostisk betydning.

Epitelceller. Skjellepitel har ikke fra munnen, nasopharynx, de stemmebåndene og epiglottis diagnostisk verdi, selv om deteksjon av et stort antall squamous celler, indikerer vanligvis en lav kvalitet spyttprøve levert til laboratoriet og spytt som inneholder betydelig forurensning.

Hos pasienter med lungebetennelse anses sputum å være egnet for undersøkelse hvis antall epitelceller med en mikroskopi med liten økning ikke overstiger 10 i synsfeltet. Et større antall epitelceller indikerer en uakseptabel dominans av orofaryngealt innhold i den biologiske prøven.

Alveolære makrofager, som i små mengder også kan finnes i noe sputum, er store celler av retikulohystocytisk opprinnelse med en eksentrisk lokalisert stor kjernen og rikelig inneslutninger i cytoplasma. Disse inneslutninger kan bestå av makrofagabsorberte små støvpartikler (støvceller), leukocytter og lignende. Antallet av alveolære makrofager øker med inflammatoriske prosesser i lungeparenchyma og luftveier, inkludert lungebetennelse.

Celler av sylindrisk ciliert epitel som bekjenner slimhinnen i strupehodet, luftrøret og bronkiene. De ser ut som langstrakte celler, utvidet i den ene enden, der kjernen og cilia befinner seg. Celler sylindrisk ciliated epitel funnet i noen sputum, men deres øke indikerer skader bronkiale mucosa og luftrør (akutt og kronisk bronkitt, bronkiektase, tracheitis, laryngitt).

Leukocytter i små mengder (2-5 i synsfeltet) finnes i noen sputum. Når betennelse i lungevæv eller bronkialslimhinne og luftrør, spesielt når suppurasjon (gangren, lungabsess, bronkiektase), øker antallet deres betydelig.

Ved farging av sputumpreparater i henhold til Romanovsky-Giemsa, er det mulig å skille mellom individuelle leukocytter, som noen ganger har en viktig diagnostisk verdi. Således øker både det totale antallet neutrofile leukocytter og antallet av degenerative former med fragmentering av kjernefysene og ødeleggelsen av cytoplasma med uttalt betennelse i lungevevvet eller bronkialslimhinnen.

En økning i antall degenerative former for leukocytter er det viktigste tegn på aktiviteten til den inflammatoriske prosessen og det mer alvorlige sykdomsforløpet.

Erytrocytter. Enkelte erytrocyter kan oppdages praktisk talt og noe sputum. En signifikant økning observeres når vaskulær permeabilitet er svekket hos pasienter med lungebetennelse, med ødeleggelse av lunge- eller bronkialvev, stagnasjon i en liten sirkulasjon, lungeinfarkt, etc. I et stort antall røde blodceller i sputum finnes under hemoptysis av enhver genese.

Elastiske fibre. Et annet element av sputumplastfibre som forekommer i sputum når ødeleggelse av lungevev (lungabscess, tuberkulose, oppløsning av lungekreft osv.) Bør også nevnes. Elastiske fibre presenteres i sputum i form av tynne tokontur, krympede filamenter med dikotom divisjon i enderne. Utseendet til elastiske fibre i sputum hos pasienter med alvorlig lungebetennelse indikerer forekomsten av en av komplikasjonene av sykdommen - abscessing av lungevevvet. I noen tilfeller, i dannelsen av lungeabsessen, kan elastiske fibre i sputum detekteres enda litt tidligere enn de tilsvarende radiografiske forandringene.

Ofte, med tynn lungebetennelse, tuberkulose, actinomycosis, fibrin bronkitt i sputumpreparater, kan tynne fibrinfibre detekteres.

Tegn på en aktiv betennelsesprosess i lungene er:

1. Sputumets natur (mucopurulent eller purulent);
2. en økning i antall nøytrofiler i sputum, inkludert deres degenerative former;
3. en økning i antall alveolære makrofager (fra enkeltklynger av flere celler i synsfeltet og mer);

Utseendet i sputumet av elastiske fibre indikerer ødeleggelsen av lungvev og dannelsen av lungeabsessen.

De endelige konklusjonene om tilstedeværelse og grad av aktivitet av betennelse og ødeleggelse av lungvev dannes bare når de sammenlignes med det kliniske bildet av sykdommen og resultatene av andre laboratorie- og instrumentelle undersøkelsesmetoder.

[1], [2], [3], [4], [5]

Mikrobiell flora

Smøremikroskopi, farget i henhold til Gram, og studien av mikrobiell flora (bakterioskopi) hos en del av lungebetennende pasienter tillater foreløpig å etablere det mest sannsynlige årsaksmedlet til lunginfeksjon. Denne enkle metoden for ekspres diagnostisering av patogenet er ikke nøyaktig nok og bør bare brukes i kombinasjon med andre (mikrobiologiske, immunologiske) metoder for sputumundersøkelse. Immersjonsmikroskopi av flekkete smører er noen ganger svært nyttig for nødvalg og administrering av tilstrekkelig antibiotikabehandling. Imidlertid bør man huske på muligheten for forurensning av bronkialinnholdet i mikrofloraen i øvre luftveiene og munnhulen, spesielt når sputuminnsamling er feil.

Sputum anses derfor egnet for videre etterforskning (bakterioskopi og mikrobiologisk undersøkelse) bare dersom den oppfyller følgende betingelser:

• Gramfarging i sputum avslører et stort antall neutrofiler (mer enn 25 i synsfeltet med en liten forstørrelse av mikroskopet);
• Antallet epitelceller, mer karakteristiske for innholdet i oropharynx, overstiger ikke 10;
• i preparatet er det en overvekt av mikroorganismer av samme morfologiske type.

På Gramfarging av sputum i en smøre noen ganger være god nok til å identifisere gram pneumokokker, streptokokker, stafylokokker og gram-negative bakterier gruppe -. Klebsiellu, stav Pfeiffer, E. Coli og andre grampositive bakterier I dette tilfellet blir blå, og Gram - rød.

Bakterielle patogener av lungebetennelse

Gram-positive	Gram
Pneumococcus Streptococcus pneumoniae. Streptokokki Streptococcus pyogenes, Streptococcus viridans. stafylokokker: Staphylococcus aureus, Staphylococcus hemolyticus.	Klær  (Klebsiella pneumoniae) Hemophilus influenzae (Pfeiffer) Haemophilius influenzae Pseudomonas aeruginosa  (Pseudomonas aeruginosa) Legionella (Legionella Pneumophilia) E. Coli (Escherichia coli)

Pre slimprøve er den enkleste måten å lungebetennelse patogen verifikasjon og har en bestemt verdi for valg av den optimale antibiotikabehandling. For eksempel, når man detekterer utstrykninger farget med Gram, grompolozhitelnyh diplokokker (pneumokokker) eller staphylococci istedenfor bredspektrede antibiotika, noe som øker risikoen for seleksjon og propagering av mikroorganismer aitibiotikorezistentnyh mulig å tilordne målrettet terapi, aktive mot stafylokokker, eller pneumokokker. I andre tilfeller, kan påvisning av de dominerende floraen i gram-utstryk indikere pas som forårsaker lungebetennelse Enterobacteriaceae er gram-negativ (Klebsiella, E. Coli, etc.), noe som krever en tilsvarende bestemmelsessted målrettet terapi.

Imidlertid kan den tentative avslutningen av sannsynlig forårsakende middel for lungeinfeksjon ved mikroskopi kun gjøres basert pas betydelig økning av bakterier i sputum, i en konsentrasjon på 10 ^{til 6} - 10 ⁷  mikrobielle celler / ml eller mer (LL Vishnjakova). Lave konsentrasjoner av mikroorganismer (<10 ³  m.ks / ml) er karakteristiske for den medfølgende mikrofloraen. Hvis konsentrasjonen av mikroorganismer varierer fra 10 ⁴  til 10 ⁶  m.ks / ml, utelukker ikke denne mikroorganismens etiologiske rolle i forekomsten av lungeinfeksjon, men viser ikke det.

Det skal også huskes at "atypiske" intracellulære patogener (mykoplasma,  legionella, klamydia, rickettsia) ikke pletter Gramm. I disse tilfellene kan det oppstå mistanke om å ha en "atypisk" infeksjon hvis smører viser en dissosiasjon mellom et stort antall nøytrofiler og et ekstremt lite antall mikrobielle celler.

Dessverre er metoden for bakterioskopi generelt ganske lav i følsomhet og spesifisitet. Ikke forutsigbar verdi, selv for vel visualiserte pneumokokker, når nesten 50%. Dette betyr at i halvparten av tilfellene gir metoden falske positive resultater. Dette er på grunn av flere grunner, hvorav en er det faktum at omtrent 1/3 av pasientene før innleggelse har fått antibiotika, som i stor grad reduserer effektiviteten av sputum smøre. Videre, selv i tilfellet av positive resultater av undersøkelsen, som viser en tilstrekkelig høy konsentrasjon i utsmøring "typiske" bakterielle patogener (f.eks pneumokokk), kan ikke helt utelukke tilstedeværelse av ko-infeksjon "atypiske" intracellulære patogener (mycoplasma, Chlamydia, Legionella).

Metoden for bakterioskopi av sputum utstråler, farget av Gram, hjelper i noen tilfeller med å verifisere forårsaket av lungebetennelse, selv om det generelt har svært lav prediktiv verdi. Atypiske intracellulære patogener (mykoplasma, legionella, klamydia, rickettsia) er ikke verifisert i det hele tatt ved hjelp av bakterioskopi, siden de ikke pletter Gramm.

Det bør nevnes muligheten for mikroskopisk diagnose hos pasienter med lungebetennelse av sopplungesinfeksjon. Det mest relevante for pasienter som får langvarig behandling med bredspektret antibiotika er deteksjon av Candida albicans sputum i form av gjærlignende celler og forgrenet mycelium ved mikroskopi av native eller fargede sputumpreparater. De indikerer en endring i mikrofloraen av trakeobronchial innholdet, som forekommer under påvirkning av antibiotisk behandling, som krever en betydelig korreksjon av terapi.

I noen tilfeller hos pasienter med lungebetennelse, er det behov for å skille den eksisterende lungesykdommen med tuberkulose. For dette formål bruke et farge smøre Ziehl-Nielsen, som i noen tilfeller tillater identifikasjon av Mycobacterium tuberculosis, men et negativt resultat av en slik undersøkelse ikke betyr mangel på TB-pasienter. Når farget sputum ifølge Tsil-Nielsen er mycobacterium tuberculosis farget rødt, og alle andre sputumelementer er blå. Tuberkuløse mykobakterier har utseende av avføring, rette eller svakt buede pinner av forskjellige lengder med separate fortykkelser. De ligger i forberedelsene i grupper eller enkeltvis. Diagnostisk verdi er deteksjon ved utarbeidelse av jevn enkelt mykobakterie tuberkulose.

For å øke effektiviteten av mikroskopisk deteksjon av mykobakterier tuberkulose bruk en rekke ekstra metoder. Den vanligste av disse er den såkalte flotasjonsmetoden, hvor homogenisert sputum blir ristet med toluen, xylen eller bensin, hvor dråpene dukker opp og fanger mykobakterier. Etter oppløsning av sputumet pipetteres topplaget på lysbildet. Da er stoffet løst og farget av Tsilyu-Nielsen. Det finnes andre metoder for akkumulering (elektroforese) og mikroskopi av tuberkulose bakterier (luminescensmikroskopi).

Mikroskopisk undersøkelse (analyse) av slim gjør det mulig å oppdage slim, cellulære elementer, fibrøse og krystallinske formasjoner, sopp, bakterier og parasitter.

celler

• Alveolære makrofager er celler av retikulogistocyt-opprinnelse. Et stort antall makrofager i sputum er detektert i kroniske prosesser og på scenen for å løse akutte prosesser i bronkopulmonært system. Alveolære makrofager som inneholder hemosiderin ("celler med hjertefeil") oppdages med mild infarkt, blødning, stagnasjon i en liten sirkel av blodsirkulasjon. Makrofager med lipiddråper er et tegn på obstruktiv prosess i bronkiene og bronkiolene.
• Xantom-celler (fete makrofager) finnes i abscess, actinomycosis, echinococcosis av lungene.
• Celler av det sylindriske cilierte epitelet er celler av slimhinnen i strupehodet, luftrøret og bronkiene; de er funnet i bronkitt, tracheitt, bronkial astma, ondartede neoplasmer i lungene.
• Det flate epitelet oppdages når spytt kommer inn i sputumet, det har ingen diagnostisk betydning.
• Leukocytter i en eller annen mengde er tilstede i hvilket som helst sputum. Et stort antall nøytrofiler oppdages i mukopurulent og purulent sputum. Eosinofiler er rike på sputum i bronkial astma, eosinofil lungebetennelse, glottis lungelesjoner og lungeinfarkt. Eosinofiler kan forekomme i sputum for tuberkulose og lungekreft. Lymfocytter i store mengder finnes i kikhoste og, sjelden, med tuberkulose.
• Erytrocytter. Deteksjon av enkeltrøde blodceller i sputum er ikke av diagnostisk betydning. Hvis det er ferskt blod i sputumet, blir uendrede erytrocytter bestemt, men hvis blodet som har vært i luftveiene i lang tid forlater med sputum, blir det funnet lektede røde blodlegemer.
• Celler av ondartede svulster finnes i ondartede neoplasmer.

fibrene

• Elastiske fibre opptrer i forfall av lungvev, som er ledsaget av ødeleggelsen av epitellaget og frigjøring av elastiske fibre; de er funnet i tuberkulose, abscess, echinokokker, neoplasmer i lungene.
• Koronale fibre blir oppdaget i kroniske lungesykdommer, som f.eks. Cavernøs tuberkulose.
• Kalkede elastiske fibre er elastiske fibre impregnert med kalsiumsalter. Deteksjon av dem i sputum er karakteristisk for brudd på tuberkulær petrikitt.

Spiraler, krystaller

• Kurshman spiraler dannes i bronkiets spastiske tilstand og tilstedeværelsen av slim i dem. Under en hostestyrke slippes viskøs slim inn i lumen av en større bronkus, vri i en spiral. Kurshman spiraler vises med bronkial astma, bronkitt, lungesvulster, komprimerer bronkier.
• Charcot-Leiden-krystallene er produktene av forfall av eosinofiler. Vanligvis vises i et sputum som inneholder eosinofiler; er karakteristiske for bronkial astma, allergiske tilstander, eosinofile infiltrater i lungene, lungeflugter.
• Kolesterolkrystaller vises med abscess, lungekinokokkose, neoplasmer i lungene.
• Krystaller av hematoidin er karakteristiske for abscess og gangren i lungen.
• Druser av actinomycete blir oppdaget i lungens aktinomykose.
• Elementer av ekkinokokker ser ut med ekkinokokker i lungene.
• Kork Dietrich - klumper av gulaktig-grå farge, har en ubehagelig lukt. De består av detritus, bakterier, fettsyrer, fettdråper. De er typiske for en abss av lunge og bronkiektase.
• Ehrlichs tetrad består av fire elementer: kalsifisert detritus, kalsifiserte elastiske fibre, kolesterolkrystaller og mycobacterium tuberkulose. Vises i forfall av kalsifisert primær tuberkulær fokus.

Mycelium og spirende svampceller vises i svampelesjoner i bronkopulmonært system.

Pneumocystis oppstår med pneumocystis lungebetennelse.

Svampesfærer oppdages ved lungekoccidioidomykose.

Asparagel larver oppdages med ascariasis.

Larvene i tarmens ugristiske er identifisert med sterkyloidiasis.

Egg av lungeflukken er identifisert med paragonimose.

Elementer funnet i sputum i bronkial astma. Når bronkial astma vanligvis skilles av en liten mengde slimete, viskøse sputum. Makroskopisk kan du se Kurshman-spiralen. Når mikroskopisk forskning er karakteristisk for tilstedeværelsen av eosinofiler, sylindrisk epitel, er det krystaller av Charcot-Leiden.