Mikrobiologisk undersøkelse av sputum

Mikrobiologisk undersøkelse er det viktigste leddet i diagnostisk søk og verifisering av det forårsakende agensen til lungebetennelse. Det innebærer ikke bare å isolere det forårsakende agensen, men også å studere dets egenskaper, inkludert følsomhet for ulike medisiner med bakteriedrepende og bakteriostatisk virkning.

For dette formålet brukes metoden med sputumsåing på forskjellige næringsmedier. I en sputumprøve som leveres til laboratoriet, velges purulente klumper og vaskes nøye i en petriskål med en isotopisk løsning av natriumklorid, som til en viss grad gjør at de frigjøres fra mikrofloraen i de øvre luftveiene. Såingen av purulente sputumklumper utføres på forskjellige næringsmedier, hvis sammensetning er beskrevet i spesielle manualer om mikrobiologi. Mediet med såkornene inkuberes ved 37,5 °C i 24 timer. Rene kulturer isoleres fra de dyrkede koloniene, de identifiseres ved kjente mikrobiologiske metoder, og deres følsomhet for antibiotika bestemmes.

For å bestemme det kvantitative innholdet av mikroorganismer homogeniseres sputumet, blandes med næringsbuljong, og det tilberedes ti ganger flere fortynninger fra blandingen, som inokuleres på petriskåler med blodagar. Etter 24 timers inkubasjon ved 37,5 °C tas resultatene i betraktning, og kolonier av samme type i utseende telles og materialets fortynningsgrad tas i betraktning. Utstryk tilberedes fra koloniene og undersøkes under et mikroskop.

Tolkning av resultater

Tolkning av resultatene av mikrobiologisk undersøkelse av sputum er ganske kompleks, noe som forklares av en rekke faktorer. Det er allerede nevnt ovenfor den konstante tilsetningen av bronkialinnhold til mikrofloraen i øvre luftveier og munnhulen, og den hyppige tilstedeværelsen i det normale trakeobronkiale innholdet hos friske mennesker av de fleste av de mest typiske årsaksmidlene til luftveissykdommer (pneumokokker, streptokokker, stafylokokker, etc.). I denne forbindelse gjør isoleringen i sputum under mikrobiologiske studier av en sammenheng av forskjellige mikroorganismer, hvorav de fleste i dette tilfellet er opportunistiske, det ekstremt vanskelig å fastslå sykdomsårsaken. For å tolke resultatene av mikrobiologisk undersøkelse av sputum er det derfor nødvendig å ta hensyn til den kvantitative overvekten av en bestemt type bakterier (mer enn 10 ⁶ -10 ⁷ mc/ml), forekomsten av visse mikroorganismer i eksaserbasjonsfasen og deres forsvinning i remisjonsperioden. Det er svært viktig å ta hensyn til det kliniske bildet av sykdommen.

De viktigste og mulige årsaksmidlene til ulike kliniske former for lungebetennelse

Klinisk form for lungebetennelse	De viktigste patogenene	Mulige patogener
Kroppsaktig	Pneumokokker	Streptokokker, Klebsiella
Etter influensa	Stafylokokker, pneumokokker, klebsiella	Haemophilus influenzae, streptokokker
Abscessing	Stafylokokker, bakteroider, blandet flora	Klebsiella, Pseudomonas aeruginosa
Aspirasjon	Bacteroides, anaerobe streptokokker	Stafylokokker, pneumokokker
Postoperativ	Stafylokokker	Pneumokokker, Klebsiella
Mellomliggende annonse	Mykoplasmer	Patogener av ornitose, psittacosis
Sekundær lungebetennelse hos sykehuspasienter uten tidligere antibakteriell behandling	Stafylokokker, pneumokokker, klebsiella, bakteroider	Escherichia coli, serratia, etc.
Sekundær lungebetennelse utviklet seg mot bakgrunnen av antibakteriell behandling	Fakultative patogene mikroorganismer	Pseudomonas, Serratia, Klebsiella, Staphylococcus, Proteus, etc.
Hos pasienter med kronisk bronkitt	Pneumokokker, Haemophilus influenzae	Stafylokokker, streptokokker
Hos pasienter med alkoholisme	Pneumokokker, Haemophilus influenzae, Klebsiella	E. coli, protozoer
Ved ervervet immunsviktsyndrom	Pneumocystis, sopp	Cytomegalovirus
Hos pasienter som får behandling fra utenforstående	Pneumokokker, stafylokokker, hemofili	Klebsiella, Escherichia coli

Når man kvantitativt vurderer resultatene av studien av mikrobiell kontaminering hos pasienter med lungebetennelse, er det nødvendig å huske på den ekstremt høye følsomheten til denne indikatoren for forskrivning av antibiotika. Selv kortvarig behandling med antibakterielle legemidler kan føre til en kraftig reduksjon i mikrobiell kontaminering, noe som ikke tillater en tilstrekkelig vurdering av resultatene av sputumstudien. Derfor er det tilrådelig å samle sputum før antibiotikabehandling forskrives.

Det skal også bemerkes at spesielle selektive næringsmedier brukes til å dyrke intracellulære patogener av lungebetennelse (mykoplasma, legionella, klamydia, rickettsia). Rutinemessig mikrobiologisk testing ved bruk av konvensjonelle næringsmedier (agar-agar) gir aldri positive resultater. Derfor bør valget av spesifikke metoder for mikrobiologisk testing utføres med deltakelse fra den behandlende legen, som er forpliktet til å informere laboratorielegen om sine mistanker om den mulige rollen intracellulære patogener spiller i forekomsten av lungebetennelse hos denne pasienten.

Det bør legges til at i reell klinisk praksis tillater selv en teknisk perfekt mikrobiologisk undersøkelse av sputum identifisering av patogenet i ikke mer enn 40–60 % av tilfellene. Derfor kan andre moderne forskningsmetoder brukes til å verifisere patogenet. Informasjonsinnholdet i en bakteriologisk studie kan økes betydelig ved å bruke trakeobronkial aspirat, væske oppnådd under bronkoalveolær lavage (BAL), bronkoskopi, etc., i stedet for sputum, som det biologiske materialet som studeres.

I tillegg kan metoden med immunofluorescens av ulike biologiske materialer (bronkoskopimateriale, blod, pleurainnhold, etc.), PCR-diagnostiske metoder og studiet av nivået av spesifikke antistoffer i blodserumet brukes til å identifisere patogener som forårsaker lungebetennelse. Dessverre har disse diagnostiske metodene ennå ikke funnet bred klinisk anvendelse og brukes for tiden bare i store spesialiserte sentre og laboratorier.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ]