Karyotypeanalyse

En av metodene for cytogenetisk forskning rettet mot å studere kromosomer er karyotyping. Analysen har en rekke indikasjoner på oppførelsen, samt flere typer. 

Karyotype er et sett med menneskelige kromosomer. Den beskriver alle egenskaper av gener: størrelse, kvantitet, form. Normalt består genomet av 46 kromosomer, hvorav 44 er autosomale, det vil si at de er ansvarlige for arvelige egenskaper (hår og øyenfarge, øreform og andre). Det siste paret er sexkromosomene som bestemmer karyotypen: kvinner 46XX og menn 46XU.

Diagnostiseringsprosessen avslører eventuelle brudd på genomet:

• Endringer i kvantitativ sammensetning.
• Brudd på strukturen.
• Krenkelse av kvalitet.

Karyotyping utføres som regel av en nyfødt for å bestemme genetiske anomalier. Analysen er også vist for par som planlegger en graviditet. I dette tilfellet avslører studien en uoverensstemmelse mellom gener, som kan føre til fødsel av et barn med arvelige patologier.

Typer molekylær karyotyping:

1. Targetnoe

Tilordnet for å bekrefte ulike abnormiteter og syndromer. Det gjør det mulig å fastslå årsakene til svangerskapstap: frosset foster, abort, avbrudd i henhold til medisinske indikasjoner. Definerer etiologien til et ekstra sett med kromosomer med triploidier. Analysen utføres på mikroarrays med 350 000 markører, konsentrert i klinisk signifikante områder av kromosomer. Oppløsningsevnen til denne studien er fra 1 million bp.

2. standard

Identifiserer brudd i genomet av klinisk betydning. Diagnostiserer mikrodeletionsyndrom og patologier assosiert med autosomale dominerende sykdommer. Bestemmer årsakene til kromosomale abnormiteter i utifferentierte syndrom hos pasienter med utviklingsavvik, medfødte misdannelser, forsinket psykomotorisk utvikling, autisme.

Det gjør det mulig å avdekke kromosomale abnormiteter i prenatalperioden. Teknikken bestemmer aneuploidi, patologiske mikrodeletjoner i fosteret. Studien er utført på en microarray med 750 000 høy tetthetsmarkører, som dekker alle signifikante deler av genomet. Oppløsningskraften til standard karyotypanalysen er fra 200 000 bp.

3. forstørret

Tillater å etablere årsakene til kromosomale abnormiteter i utifferentierte syndrom hos barn. Identifiserer patogene deletjoner, det vil si forsvinner av kromosomregioner og duplisering - flere kopier av gener. Diagnostiserer steder med tap av heterozygositet, årsaker til autosomale recessive patologier.

Utvidet kromosomikroarrayanalyse utføres ved bruk av en mikrograve med høy tetthet som inneholder mer enn 2,6 millioner individuelle høydensitetsmarkører. Oppløsningsstyrken i denne studien tillater å dekke hele genomet og varierer fra 50 000 bp. Takket være dette blir alle deler av genkoden studert med den største presisjonen, noe som gjør det mulig å avsløre de minste strukturelle forstyrrelsene.

Som regel utføres analysen for karyotype i henhold til genetikkens formål. Avhengig av de medisinske indikasjonene kan en av de ovennevnte typene tilordnes. En standardstudie koster mindre, men det er sjelden foreskrevet, fordi det ikke avslører mange kromosomale abnormiteter. Målkaryotyping er en dyrere analyse, så den er foreskrevet i nærvær av kliniske tegn på syndrom og andre anomalier. Utvidet diagnose er den dyreste og mest informative, da det tillater å fullføre alle 23 sett med kromosomer.

Hvor skal analysen gis på karyotype?

Kromosomal mikromatrixanalyse overleveres som foreskrevet av en genetiker. Studien tar sikte på å studere pasientens genom og avsløre eventuelle uregelmessigheter i strukturen.

Kromosomer er DNA-tråder, deres antall og struktur har sin egen spesifisitet for hver art. Menneskekroppen inneholder 23 par kromosomer. Ett par bestemmer sexet: i kvinner 46XX kromosomer, og hos menn 46XY. De gjenværende gener er autosomer, det vil si ikke-gener.

Funksjoner av karyotyping:

• Analysen utføres 1 gang, siden kromosomsettet ikke endres gjennom livet.
• Tillater å opprette årsakene til reproduktive problemer i ektefellene.
• Diagnostiserer flere misdannelser hos barn.
• Identifiserer genetiske abnormiteter.

Karyotype er gitt i et spesialisert medisinsk laboratorium eller i et genetisk senter. Studien utføres av en kvalifisert lege. Testen er som regel klar innen 1-2 uker. Resultatene deklareres av genetikeren.

Indikasjoner for prosedyren karyotypeanalyse

Prosessen med karyotyping er tilordnet nyfødte barn for påvisning av genetiske abnormiteter og arvelige patologier, samt for menn og kvinner i graviditetsplanleggingen. Det er også en rekke andre indikasjoner for analysen:

• Mannlig og kvinnelig infertilitet av ukjent opprinnelse.
• Mannlig infertilitet: alvorlig og ikke-obstruktiv oligozoospermi, teratozoospermi.
• Spontan abort: Miscarriages, frosset foster, for tidlig fødsel.
• Primær amenoré.
• Tilfeller av tidlig død av nyfødte i anamnese.
• Barn med kromosomale abnormiteter.
• Barn med flere medfødte misdannelser.
• Foreldrenes alder er over 35 år.
• Flere mislykkede forsøk på IVF-befruktning.
• Arvelig sykdom i en av fremtidens foreldre.
• Hormonale lidelser hos kvinner.
• Spermatogenese av ukjent etiologi.
• Nært relaterte ekteskap.
• Ufordelt økologisk levemiljø.
• Langvarig kontakt med kjemikalier, bestråling.
• Skadelige vaner: røyking, alkohol, narkotika, rusmiddelavhengighet.

Karyotyping av barn utføres i slike tilfeller:

• Medfødte misdannelser.
• Psykisk retardasjon.
• Forsinkelse i psykomotorisk utvikling.
• Mikroanomalia og forsinket psyko-tale utvikling.
• Seksuelle anomalier.
• Overtredelse eller forsinkelse av seksuell utvikling.
• Vekstretardering.
• Prognose av barnets helse.

Diagnose anbefales for alle ektefeller i graviditetsplanleggingen. Analysen kan også utføres under graviditet, det vil si prenatal kromosomal forskning.

Hvordan ser karyotypen ut?

Totalt antall tegn på et komplett sett med kromosomer er en karyotype. For systematisering av kromosomanalyser brukes den internasjonale cytogenetiske nomenklaturen, som er basert på differensiell farging av genomet for en detaljert beskrivelse av hele DNA-strengen.

Studien avslører:

• Trisomi - i paret er det et tredje ekstra kromosom.
• Monosomi - ett par mangler ett kromosom.
• Inversion - genomsvinget.
• Translocation er bevegelse av nettsteder.
• Sletting er tap av nettstedet.
• Duplisering - dobling av fragmentet.

Resultatene av analysen registreres ved hjelp av dette systemet:

1. Det totale antall kromosomer og settet av kjønnsorganer er 46, XX; 46, XY.
2. Ekstra og manglende kromosomer er indikert, for eksempel 47, XY, + 21; 46, XY-18.
3. Den korte armen av genomet er betegnet med symbolet - p, og den lange - q.
4. Translokasjonen er t, og slettingen er del, for eksempel 46, XX, del (6) (p12.3)

Den klare analysen for karyotypen er som følger:

• 46, XX - normen eller rangere kvinnen.
• 46, XY er normen til en mann.
• 45, X - Shereshevsky-Turner syndrom.
• 47 XXY - Klinefelters syndrom.
• 47, XXX - trisomi på X-kromosomet.
• 47, XX (XY), +21 - Downs syndrom.
• 47, XY (XX), + 18 - Edwards syndrom.
• 47, XX (XY), + 13 - Patau syndromet.

Cytogenetisk forskning avslører ulike anomalier i strukturen av DNA-tråder. Analysen diagnostiserer også predisposisjoner til mange sykdommer: endokrine patologier, hypertensjon, leddskader, myokardinfarkt og andre.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7], [8]

Forberedelse

Blodceller brukes til analyse på karyotype, derfor er det svært viktig å klargjøre seg riktig for diagnose.

Forberedelse for kromosomforskning begynner 2 uker før den tas og består av å ekskludere påvirkning på kroppen av slike faktorer:

• Akutte og kroniske sykdommer.
• Mottak av medisiner.
• Drikker alkohol og rusmidler, røyking.

For analysen brukes venøs blod i 4 ml. Blodprøvetaking utføres på tom mage.

[9], [10], [11], [12], [13], [14], [15], [16]

Teknikk karyotypeanalyse

Det menneskelige genomet kan ikke ses med det blotte øye, kromosomene er kun synlige under et mikroskop ved visse faser av cellefordeling. For å bestemme karyotypen benyttes single-nucleated leukocytter, hudfibroblaster eller benmargceller. For studien er celler egnet i metafasen av mitose. Den biologiske væsken plasseres i et reagensrør med litium og heparin. Blod dyrkes i 72 timer.

Da er kulturen beriket med spesielle stoffer, som stopper celledeling på den nødvendige fasen for diagnose. Fra kulturen gjør stoffer på glasset, som er gjenstand for etterforskning. Ytterligere informasjon om tilstanden til genomet er oppnådd ved farging. Hvert kromosom har striering, som er tydelig synlig etter farging.

I en klassisk kromosomal studie utføres fargingen med forskjellige farger og deres blandinger. Fargestoffet binder seg til forskjellige deler av genomet annerledes, noe som gjør fargingen ujevn. På grunn av dette dannes et kompleks av tverrkarakterer som reflekterer den lineære heterogeniteten av kromosomet.

Grunnleggende fargemetoder:

• Q - gir bilder med høy detalj. Denne metoden ble kalt flekker av Caspersson med acrichin-sennep med diagnostikk under et fluorescerende mikroskop. Det brukes til å analysere det genetiske kjønet, identifisere translokasjoner mellom X og Y, Y og autosomer, og også for screening av mosaikk med Y-kromosomer.
• G er en modifisert Romanovsky-Giemsa metode. Har en høyere sensitivitet i forhold til Q. Den brukes som en standardmetode for cytogenetisk analyse. Identifiserer små avvik, markørkromosomer.
• R - brukes til å detektere homologe G- og Q-negative regioner. Genomet er behandlet med akridin oransje fargestoff.
• C - analyserer sentromeriske regioner av kromosomer med konstitutiv heterochromatin og den veritable distale delen av Y.
• T - brukes til å analysere telomeriske DNA-strengområder.

De fargede og faste cellene fotograferes under et mikroskop. Fra det resulterende settet av fotografier danner et nummerert sett med par av autosomer, det vil si en systematisk karyotype. Bildet av DNA-tråder er orientert vertikalt, nummereringen avhenger av størrelsen, med et par sexkromosomer som dekker settet.

Blodpreparater analyseres under et mikroskop av 20-100 metafaseplater for å oppdage kvantitative og strukturelle avvik.

• Kvantitative avvik er endringer i antall gener. Liknende er observert med Downs syndrom, når det er ekstra 21 kromosomer.
• Strukturelle avvik er en forandring i kromosomene selv. Dette kan være et fall av genomet, overføringen av en del til en annen, en rotasjon på 180 grader og mer.

Karyotypingsteknikken er en mektig prosess. Studien utføres av høyt kvalifiserte spesialister. Det kan ta en hel arbeidsdag å diagnostisere en enkelt persons genom.

Analyse av karyotype av ektefeller

Når de gifter seg, står mange par overfor problemet med oppfattelsen. Cytogenetisk analyse er vist å løse reproduktive problemer. Karyotyping av ektefeller gjør det mulig å avsløre anomalier i strukturen av genomet, som forstyrrer å ha barn eller forstyrrer gestasjonsprosessen. Endre karyotype er umulig, men takket være diagnosen kan du bestemme de sanne årsakene til infertilitet og abort, finne måter å løse dem på.

CMA-analyse utføres for å detektere abnormaliteter i strukturen og konstruksjonen av DNA-trådene, noe som kan være årsaken til arvelige sykdommer hos fosteret eller par infertilitet. Det er internasjonale standarder for å analysere fremtidige foreldre:

• Kromosomale patologier i slekten, i familien.
• Abort av graviditet i en anamnese.
• Graviditeten er eldre enn 35 år.
• Langvarige mutagene effekter på kroppen.

Til dags dato benyttes slike metoder for karyotyping:

1. Analyse av kromosomer i blodceller.

Det gjør det mulig å identifisere tilfeller av infertilitet når sjansen til å få barn er betydelig redusert eller helt fraværende fra en av ektefellene. Undersøkelsen bestemmer også risikoen for genomets ustabilitet. For å behandle abnormiteter kan pasienter bli foreskrevet antioksidanter og immunmodulatorer, noe som reduserer svikt av unnfangelse.

Venøs blod er tatt for studien. Fra det biologiske væske er lymfocytter isolert, som stimuleres i et reagensrør, behandlet med en spesiell substans, farget og studert. For eksempel, med Klinefelters syndrom, som manifesterer seg som mannlig infertilitet, er det et ekstra kromosom 47 XX i karyotypen. Også strukturelle endringer i genomet kan identifiseres: inversjon, sletting, translokasjon.

2. Prenatal undersøkelse.

Definerer kromosompatologier av fosteret i de tidlige stadiene av graviditeten. En slik undersøkelse er nødvendig for å diagnostisere genetiske sykdommer eller misdannelser som fører til fosterdød i utero.

For å utføre forskning kan slike metoder brukes:

• Ikke-invasiv - trygg for mor og foster. Diagnosen utføres ved hjelp av et barns ultralyd og en detaljert biokjemisk analyse av en kvinnes blod.
• Invasiv - chorionic villus sampling, cordocentesis, platsentotsentez fostervannsprøve. For analyse gjennomført gjerde placenta eller chorionic celler, fostervann eller blod fra navlestreng. Til tross for høy diagnostisk treffsikkerhet, invasive teknikker har en økt risiko for komplikasjoner er derfor utført bare under streng medisinsk indikasjon for detektert under ultralyd foster patologi, ny mor eldre enn 35 år gammel, foreldre med kromosomale abnormaliteter, endringer i biokjemiske blod markører.

For cytogenetisk forskning kan ikke bare blod, men også ejakulering brukes. Denne metoden kalles Tunel og gjør det mulig å bestemme en av de vanligste årsakene til mannlig infertilitet under en normal karyotype-fragmentering av sperm DNA.

Hvis det er genmutasjoner eller kromosomavvik i en av ektefellene, forteller legen om mulige farer og sannsynligheten for et barn med avvik. Siden genpatologiene er uhelbredelige, blir den videre avgjørelsen av paret tatt selvstendig: bruk donormateriale (sæd, egg), fare for fødsel eller opphold uten barn.

Hvis avvikene i genomet oppdages i behandlingsprosessene, både hos kvinner og i embryoer, anbefaler leger at slike graviditeter blir avbrutt. Dette skyldes økt risiko for en fødsels fødsel med alvorlig, og i noen tilfeller uforenlig med liv, avvik. Å gjennomføre analysen og dechiffrere resultatene er gjort av en genetiker.

[17], [18], [19], [20], [21]

Blodtest for karyotype

Ofte utføres karyotyping på analysen av venøst blod ved å dyrke cellene. Men for å utføre cytogenetisk forskning kan et annet biologisk materiale brukes:

• Celler fra fostervann.
• Morkaken.
• Fostre celler.
• Abortivt materiale.
• Benmarg.

Hvilket materiale som skal tas for diagnose, avhenger av årsaken og oppgaven til analysen. En omtrentlig algoritme for blodprøving:

• Et lite volum væske i 72 timer plasseres i et næringsmedium ved en temperatur på 37 ° C.
• Siden kromosomene er synlige på scenen av metafasen av celledeling, blir et reagens tilsatt til det biologiske medium, som stopper fissionsprosessen i den nødvendige fase.
• Cellekulturen er farget, fast og analysert under et mikroskop.

Analyse av blod karyotype gir svært nøyaktig påvisning av eventuelle uregelmessigheter i strukturen av DNA-trådene: intrachromosomal og interchromosomal rearrangementer, endre rekkefølgen av genomiske fragmenter begge. Hovedformålet med diagnosen er å identifisere genetiske sykdommer.

[22], [23], [24], [25], [26], [27]

Genetisk analyse av karyotype

Cytogenetisk diagnose med sikte på å studere størrelsen, antall og formen på kromosomer er genetisk karyotyping. Analysen har slike indikasjoner for å utføre:

• Identifikasjon av fødselsskader.
• Risiko for et barn med arvelige patologier.
• Mistanke om infertilitet.
• Brudd på spermogram.
• Uavhengig av graviditet.
• Utarbeide en plan for behandling av visse typer neoplastiske svulster.

Også, genetisk analyse for karyotype er inkludert i listen over obligatoriske for ektefeller som har tenkt å få barn.

Ofte viser studien slike patologier:

1. Aneuplodia er en forandring i antall kromosomer både i retning av økende og avtagende. Brudd på balanse fører til miscarriages, fødsel av spedbarn med alvorlige medfødte patologier. Mosaikkformen av aneuploidi forårsaker Downs syndrom, Edwards syndrom og andre svært inkompatible sykdommer.
2. Rebuild karyotype - hvis endringene er balansert, er kromosomsettet ikke ødelagt, men bare annerledes bestilt. Med ubalanseendringer er det en trussel om genmutasjoner, noe som er spesielt farlig for fremtidige generasjoner.
3. Translokasjon er en uvanlig struktur av DNA-tråder, det vil si erstatning av et fragment av genomet av en annen. I de fleste tilfeller er det arvet.
4. Brudd på seksuell differensiering er en ekstremt sjelden kromosomal lidelse, som ikke alltid manifesteres av ytre symptomer. Manglende overholdelse av fenotypisk sex kan være en av årsakene til infertilitet.

Analyse for karyotype utføres i genetiske laboratorier, kvalifiserte legere av genetikk.

Karyotype analyse med avvik

Aberrasjoner er forstyrrelser i kromosomens struktur, forårsaket av diskontinuiteter og omfordeling med tap eller duplisering av genetisk materiale. Karyotyping med avvik er en studie rettet mot å oppdage eventuelle endringer i genomets struktur.

Typer av avvik:

• Kvantitativ - et brudd på antall kromosomer.
• Strukturell - et brudd på strukturen av genomet.
• Regelmessig - bestemmes i de fleste eller alle kroppens celler.
• Uregelmessig - oppstår på grunn av påvirkning på kroppen av ulike uønskede faktorer (virus, stråling, kjemiske effekter).

Analysen bestemmer karyotypen, dens egenskaper, tegn på virkningen av ulike negative faktorer. Kromosomal undersøkelse med avvik er utført i slike tilfeller:

• Infertilitet i ekteskapet.
• Spontane miskramper.
• Saker av dødfødsel i anamnesen.
• Tidlig spedbarnsdødelighet.
• Frossen graviditet.
• Medfødte misdannelser.
• Overtredelse av seksuell differensiering.
• Mistanke om kromosomal patologi.
• Forsinket mental, fysisk utvikling.
• Eksamen før IVF, ICSI og andre reproduksjonsprosedyrer.

I motsetning til klassisk karyotyping, tar denne analysen mer tid til å holde og koster mer.

Karyotype analyse for et barn

Ifølge medisinsk statistikk spiller medfødte patologier en viktig rolle i årsakene til spedbarnsdødelighet. For tidlig påvisning av genetiske abnormiteter og arvelige sykdommer, blir barnet analysert for karyotype.

• Ofte blir barn diagnostisert med trisomi - Downs syndrom. Denne patologien forekommer hos 1 av 750 babyer og manifesterer seg i ulike typer avvik i både fysisk og intellektuell utvikling.
• På andre plass i utbredelsen av Klinefelters syndrom. Det manifesterer seg som en forsinkelse i seksuell utvikling i ungdomsårene og forekommer hos 1 av 600 nyfødte hanner.
• En annen genetisk patologi diagnostisert hos 1 av 2500 kvinnelige barn er Shereshevsky-Turner-syndromet. I barndommen gjør denne sykdommen seg ved økt pigmentering av huden, hevelse av føttene, hendene og skinnene. Under puberteten, det er mangel på menstruasjon, hårlinjen under armhulene og på skjønnhet, er også brystkjertlene ikke utviklet,

Karyotyping er nødvendig ikke bare for småbarn med synlige avvik, da det tillater å mistenke genetiske problemer og begynne å korrigere dem. Analysen er overlevert i det medisinske genetiske senteret. Avhengig av barnets alder, kan blodet tas fra hælen eller fra venen. Om nødvendig kan en genetiker kreve en analyse av karyotypen og foreldrene.

Analyse av nyfødt karyotype

Neonatal screening er den første analysen som utføres av nyfødte. Studien gjennomføres i barselhuset i 3-4 dager i livet, for premature babyer på dag 7. Tidlig karyotyping gjør det mulig å avsløre genetiske abnormiteter og forstyrrelser i DNA-strukturen før synlige patologiske symptomer oppstår.

For tidlig diagnose, bruk blod fra hælen til babyen. Cytogenetisk forskning tar sikte på å identifisere slike vanlige patologier blant barn som:

• Fenylketonuri er en arvelig sykdom som er preget av nedsatt aktivitet eller fravær av et enzym som spalter aminosyren fenylalanin. Når det utvikles fører til forstyrrelse i hjernen og mental retardasjon.
• Cystisk fibrose - påvirker kjertlene som produserer hemmeligheter, fordøyelsessaft, svette, spytt, slim. Forårsaker forstyrrelser i lunger og organer i fordøyelseskanalen. Sykdommen er arvet.
• Medfødt hypothyroidisme er en lesjon av skjoldbruskkjertelen med utilstrekkelig produksjon av dets hormoner. Det fører til en forsinkelse i fysisk og mental utvikling.
• Adrenogenitalt syndrom er en patologisk tilstand hvor adrenal cortex produserer en utilstrekkelig mengde hormoner. På grunn av dette er utviklingen av kjønnsorganer forstyrret.
• Galactesymia er en patologi der transformasjonen av galaktose til glukose forstyrres. Behandlingen består av avvisning av meieriprodukter. Uten rettidig diagnose kan det føre til blindhet og død.

Hvis det i henhold til resultatene av analysen av karyotypen hos det nyfødte, oppdages eventuelle avvik eller uregelmessigheter, blir det utført et sett med tilleggsstudier for å klargjøre diagnosen. Slike tidlige diagnoser vil bidra til å identifisere eventuelle problemer i barnets kropp i tide og begynne behandling.

[28], [29], [30], [31], [32], [33], [34]

Hvor mye analyse er gjort for karyotypen?

Varigheten av kromosomforskningen tar fra 10 til 21 dager. Når resultatene er klare, avhenger av typen analyse, det vil si med avvik eller klassisk karyotyping.

Den klare analysen for karyotype inneholder slik informasjon:

• Antallet av kromosomer.
• Er det noen endring i strukturen til kromosomene.
• Er det noen brudd i rekkefølgen av genomet.

Dekryptering av resultatene og deres tolkning er genetisk ansvar. Hvis det oppdages noen avvik, gir legen lege for videre diagnose eller veiledning om behandling.

Normal ytelse

Normale karyotyper for mennesker er 46, XX eller 46, XY. Som regel skjer deres endring i de tidlige stadiene av kroppens utvikling:

• Ofte oppstår forstyrrelsen i løpet av gametogenesen (pre-embryonisk utvikling), når foreldrenes kjønnceller produserer kyotypen av zygoten. Den videre utvikling av en slik zygot fører til at alle celler i embryoet inneholder et unormalt genom.
• Brudd kan oppstå i de tidlige stadier av å dele zygotene. I dette tilfellet inneholder embryoet flere cellulære kloner med forskjellige karyotyper. Det er at mosaikk utvikler seg - mangfoldet av karyotyper av hele organismen og dets organer

Endringer i genomet manifesteres av ulike patologier og vices. Vurder de vanlige karyotypeanomaliene:

• 47, XXY; 48, XXXY - Klinefelters syndrom, polysomi på X-kromosomet hos menn.
• 45X0; 45X0 / 46XX; 45, X / 46, XY; 46, X iso (Xq) - Shereshevsky-Turner syndrom, X kromosom monosomi, mosaikk.
• 47, XXX; 48, XXXX; 49, XXXXX - polysomi på X-kromosomet, trisomi.
• 47, XX, + 18; 47, ХY, + 18 - Edwards syndrom, trisomi på 18 kromosomet.
• 46, XX, 5p - catnip scream syndrome, sletting av kort arm 5 par genom.
• 47, XX, + 21; 47, XY, + 21 - Downs sykdom, trisomi på 21 kromosomer.
• 47, XX, + 13; 47, ХY, + 13 - Patau syndrom, trisomi på kromosom 13.

Cytogenetisk forskning tar sikte på å bestemme DNA-strengens tilstand, identifisere feil og anomalier. Eventuelle avvik fra normale indekser er en anledning til en kompleks undersøkelse av kroppen.

[35], [36], [37], [38], [39], [40], [41], [42], [43], [44], [45], [46]

Enheten for analyse

For å dechifere karyotypen, anvendes sekvenseringsmetoden. Denne teknikken ble utviklet i 1970 og er basert på å bestemme sekvensen av aminosyrer i DNA. Sekvenseringsmaskiner bruker interaktive sykliske enzymatiske reaksjoner med videre behandling og sammenligning av de oppnådde resultater.

Grunnleggende funksjoner av sekvenser:

• Primær komplett studie av ukjente genomer, exomer, transkripsjoner.
• Karyotypering.
• Paleogenetika.
• Metagenomics og mikrobiell mangfold.
• Resequencing og kartlegging.
• DNA-metyleringsanalyse.
• Analyse av transkripsjoner.

I første fase oppretter apparatet et bibliotek med tilfeldige sekvenser av DNA-tråder. Deretter oppretter amplikon med PCR, som brukes som prøver. På siste stadium bestemmes primærstrukturen av alle fragmenter.

Sequencers av den nyeste generasjonen er fullt automatiserte og mye brukt for genomisk analyse, noe som minimerer produksjonen av feilaktige resultater på grunn av den menneskelige faktoren.

Tolkning av resultater av analysen på karyotype

Tolkning av resultatene av cytogenetisk forskning er utført av en genetiker. Analysen er som regel klar i 1-2 uker, og kan se slik ut:

• 46XX (XY), er gruppert i 22 par og 1 par sex. Genomet har en normal størrelse og struktur. Anomalier ikke avslørt.
• Genomet er ødelagt, mer enn 46 kromosomer oppdages. Formen og størrelsene på en / flere kromosomer er unormale. Parene til genomet er brutt / feil gruppert.

Med hensyn til patologiske abnormiteter i karyotypen skiller de slike vanlige lidelser:

• Trisomi er et ekstra somatisk kromosom. Downs syndrom, Edwards syndrom.
• Monosomi er tapet av ett kromosom.
• Sletting er fraværet av et genomsted. -46, xx, 5p-cat's scream syndrome.
• Translokasjon er overføringen av en del av genomet til en annen.
• Duplisering er duplisering av et fragment.
• Inversjon - rotasjon av et fragment av et kromosom.

Basert på resultatene av analysen på karyotype, gjør legen en konklusjon om tilstanden til genotypen og graden av genetisk risiko. Ved de minste endringene i strukturen av DNA-tråder, er et sett med tilleggsstudier tildelt. Identifiserte avvik kan ikke manifesteres, men øker risikoen for fødsel av barn med genetiske abnormiteter.