Infeksiøs mononukleose: antistoffer mot Epstein-Barr-virus i blod

Infeksiøs mononukleose er en vanlig systemisk lymfoproliferativ lidelse som oftest er forårsaket av Epstein-Barr-viruset. Toxoplasma gondii og andre virus (CMV, humant immunsviktvirus og humant herpesvirus type 6, som er kjent som årsaken til plutselig eksantem) kan forårsake klinisk lignende sykdommer. Disse samme etiologiske agensene kan antagelig forårsake utviklingen av kronisk utmattelsessyndrom.

Epstein-Barr-virus er et herpesvirus som har en tropisme for B-lymfocytter og vedvarer i vertsceller i lang tid som en latent infeksjon. Det er utbredt over hele verden. I struktur og størrelse er Epstein-Barr-viruset umulig å skille fra andre herpesvirus, men skiller seg betydelig fra dem i antigene egenskaper. Viruset har et membranantigen (MA - membranantigen), et nukleært antigen (EBNA - Epstein-Barris nukleinantigen) og et antigen av viruskapsidet (VCA - viruskapsideantigen).

Infeksjon oppstår når viruset overføres med spytt. Når Epstein-Barr-viruset kommer inn i kroppen, infiserer det faryngeale epitel, noe som forårsaker betennelse og feber – typiske kliniske tegn på utvikling av infeksiøs mononukleose. Viruset er strengt lymfotropisk, og fester seg til C3α-reseptoren i B-lymfocyttcellemembranen. Det forårsaker proliferasjon av polyklonale B-lymfocytter med en tilsvarende økning i mandler, systemisk lymfadenopati og splenomegali. B-lymfocytter transformeres (får evnen til å dele seg uendelig), og i fravær av en tilstrekkelig cellulær immunrespons kan denne prosessen utvikle seg til en klart ondartet prosess (for eksempel ved X-bundet lymfoproliferativt syndrom). Hvis cellulære immunitetsfaktorer kontrollerer replikasjonen av Epstein-Barr-viruset i kroppen, forsvinner de kliniske symptomene på infeksiøs mononukleose gradvis.

Som andre herpesvirus kan EBV vedvare som en latent infeksjon (DNA-et finnes i kjernen til et lite antall B-lymfocytter). Av og til er asymptomatisk reaktivering av infeksjonen vanlig, og omtrent 20 % av friske unge voksne skiller ut EBV i spyttet. Personer med nedsatt cellulær immunitet (f.eks. AIDS, ataksi-telangiektasi, transplantasjonsmottakere) kan utvikle åpenbar reaktiv infeksjon med hårete leukoplaki, interstitiell pneumonitt eller monoklonalt B-cellelymfom. EBV har vært implisert i etiologien til nasofaryngealt karsinom og Burkitts lymfom.

En av manifestasjonene av infeksiøs mononukleose er forekomsten av atypiske lymfocytter i det perifere blodet (opptil 10 % av det totale antallet lymfocytter). Atypiske lymfocytter oppdages i blodet fra begynnelsen av perioden med kliniske manifestasjoner av infeksjonen. Innholdet av dem i blodet når en topp innen slutten av den andre eller begynnelsen av den tredje uken og kan forbli på dette nivået i opptil 1,5–2 måneder. Fullstendig forsvinning skjer vanligvis innen begynnelsen av den fjerde måneden etter sykdomsdebut. Tilstedeværelsen av atypiske lymfocytter er et relativt ufølsomt tegn på infeksjon forårsaket av Epstein-Barr-viruset, men har en generell spesifisitet på omtrent 95 %.

Proliferasjon av polyklonale B-lymfocytter ved infeksjon forårsaket av Epstein-Barr-virus genererer et stort antall forskjellige autoantistoffer i pasientens kropp, som IgM anti-i (kald agglutinin), revmatoid faktor og antinukleære antistoffer. De fleste av de uvanlige Ig som opptrer ved infeksiøs mononukleose kalles Paul-Bunnell heterofile antistoffer. Disse antistoffene tilhører IgM-klassen, de har en affinitet for erytrocytter fra sau og hest, og er ikke rettet mot noen Epstein-Barr-virusantigener. Heterofile antistoffer er et tilfeldig produkt av B-lymfoidproliferasjon (forårsaket av Epstein-Barr-virus), de opptrer i den første uken med infeksiøs mononukleose og forsvinner gradvis under rekonvalesensen. De oppdages vanligvis ikke etter 3–6 måneder.

Etter hvert som det første akutte infeksjonsstadiet blir latent, dukker Epstein-Barr-virusgenomer (unike antigener) opp i store mengder i alle celler, og det nukleære antigenet frigjøres til miljøet. Som respons på antigenet syntetiseres spesifikke antistoffer – verdifulle markører for sykdomsstadiet. Kort tid etter infeksjon oppdager B-lymfocytter et tidlig antigen (EA), et protein som er nødvendig for replikasjonen av Epstein-Barr-viruset (og ikke en strukturell viruskomponent). Antistoffer av IgM- og IgG-klassene syntetiseres i pasientens kropp mot det tidlige antigenet. Sammen med det komplette Epstein-Barr-virusvirionet dukker virale kapsidantigener (VCA) og membranantigen (MA) opp. Etter hvert som den infeksjonelle prosessen avtar, unngår en liten prosentandel av Epstein-Barr-virusinfiserte B-lymfocytter immundestruksjon og beholder virusgenomet i latent form. Epstein-Barr-virusets nukleære antigen (EBNA) er ansvarlig for duplisering og overlevelse.

Laboratorietester kan påvise antistoffer mot ulike antigener.

Av de serologiske metodene for diagnostisering av infeksiøs mononukleose er den vanligste Paul-Bunnell-reaksjonen (agglutinasjon), som tar sikte på å identifisere heterofile antistoffer i serumet. En titer av heterofile antistoffer på 1:224 eller høyere i pasientens blodserum er anerkjent som diagnostisk signifikant, noe som bekrefter diagnosen infeksiøs mononukleose. Heterofil agglutinasjon er positiv hos 60 % av unge mennesker etter 2 uker og hos 90 % etter 4 uker fra sykdommens begynnelse. For å diagnostisere infeksiøs mononukleose er det derfor nødvendig å gjennomføre flere studier: i den første uken av sykdommen (reaksjonen kan være negativ) og etter 1-2 uker (reaksjonen kan bli positiv). Innholdet av heterofile antistoffer avtar ved slutten av den akutte perioden av den infeksjonelle prosessen, men titeren deres kan bestemmes innen 9 måneder etter at kliniske symptomer har oppstått. Paul-Bunnell-reaksjonen kan gå fra positiv til negativ, selv mot bakgrunn av gjenværende hematologiske og kliniske symptomer hos pasienten. Metodens sensitivitet hos voksne er 98 %, spesifisiteten er 99 %. Hos barn med infeksiøs mononukleose under 2 år påvises heterofile antistoffer kun hos 30 % av pasientene, i alderen 2–4 år – hos 75 %, over 4 år – mer enn 90 %. Metodens sensitivitet hos barn er mindre enn 70 %, spesifisiteten er 20 %. En reduksjon og deretter en gjentatt økning i titeren av heterofile antistoffer kan oppstå som respons på en annen infeksjon (oftest ved virusinfeksjoner i øvre luftveier). Paul-Bunnell-reaksjonen er uspesifikk for Epstein-Barr-viruset. Titeren av heterofile antistoffer kryssreagerer ikke og korrelerer ikke med spesifikke antistoffer mot Epstein-Barr-viruset, det er heller ingen korrelasjon med sykdommens alvorlighetsgrad. Testen er ubrukelig for å diagnostisere kronisk infeksiøs mononukleose (den er positiv i gjennomsnitt hos bare 10 % av pasientene).

Titre på 1:56 og mindre kan finnes hos friske personer og hos pasienter med andre sykdommer (revmatoid artritt, røde hunder). Falskt positive testresultater er svært sjeldne.

For tiden brukes «single spot»-metoden (slide-agglutinasjon) for å bestemme antistoffer mot røde blodceller fra sauer; den brukes i utgangspunktet som en screeningtest. Når det gjelder sensitivitet, er den sammenlignbar med Paul-Bunnell-reaksjonen. Slidetester kan være falskt positive i omtrent 2 % av studiene (ved leukemi, malignt lymfom, malaria, røde hunder, viral hepatitt, pankreatisk karsinom), og falskt negative hos voksne - i 5–7 % av tilfellene.

Det skal bemerkes at utvalget av diagnostiske testsystemer produsert av selskaper basert på bestemmelse av antistofftitre er svært bredt, derfor er det nødvendig å fokusere på den diagnostiske antistofftiteren som er angitt i instruksjonene for testsystemene.

Hvis heterofile antistoffer ikke oppdages og det kliniske bildet av sykdommen tilsvarer infeksiøs mononukleose, er det nødvendig å undersøke blodserumet for spesifikke antistoffer av IgM- og IgG-klassene. For å oppdage spesifikke antistoffer mot Epstein-Barr-viruset brukes indirekte immunofluorescensmetoder (tillater deteksjon av antistoffer mot EA- og VCA-antigener), antikomplement-immunofluorescens (detekterer antistoffer mot EA-, VCA- og EBNA-antigener) og ELISA.

Antistoffer mot EA-antigen D-komponenten (anti-EA-D) opptrer selv i den latente perioden med primærinfeksjon og forsvinner raskt ved bedring.

Antistoffer mot EA-antigen R-komponenten (anti-EA-R) kan påvises 3–4 uker etter kliniske manifestasjoner av sykdommen. De vedvarer i blodserumet i omtrent et år, og påvises ofte ved atypisk eller langvarig infeksiøs mononukleose. Disse antistoffene finnes vanligvis ved Burkitts lymfom.

Antistoffer mot VCA-klasse IgM (anti-VCA IgM) oppstår svært tidlig, vanligvis før kliniske symptomer, og de oppdages ved sykdomsdebut i 100 % av tilfellene. Høye titere oppstår 1–6 uker etter infeksjonsdebut, de begynner å avta fra den tredje uken og forsvinner vanligvis etter 1–6 måneder. Anti-VCA IgM er nesten alltid tilstede i serum under aktiv infeksjon, så metoden for å oppdage dem er svært sensitiv og spesifikk for en akutt episode av infeksiøs mononukleose.

Antistoffer mot VCA-klasse IgG (anti-VCA IgG) kan oppstå tidlig (ved 1–4 uker), og antallet når en topp innen den andre måneden av sykdommen. Ved sykdomsdebut oppdages de i 100 % av tilfellene. Bare 20 % av pasientene viser en 4-dobling i titer ved undersøkelse av paret serum. Titeren avtar under rekonvalesensen, men er detekterbar i flere år etter infeksjonen, så den er ubrukelig for å diagnostisere infeksiøs mononukleose. Tilstedeværelsen av anti-VCA IgG indikerer tilstanden etter infeksjonen og immuniteten.

Antistoffer mot EBNA (anti-EBNA) opptrer sist og er sjelden tilstede i sykdommens akutte fase. Innholdet av disse øker i rekonvalesensperioden (innen 3–12 måneder), og de kan forbli i blodet i mange år etter sykdommen. Fravær av anti-EBNA i nærvær av anti-VCA IgM og anti-EA IgM indikerer en pågående infeksjon. Påvisning av anti-EBNA etter en tidligere negativ reaksjon indikerer en eksisterende infeksjon. Ved hjelp av ELISA-metoden er det mulig å samtidig bestemme tilstedeværelsen av anti-EBNA-klassene IgM og IgG. Hvis mengden anti-EBNA IgM er større enn anti-EBNA IgG, bør en akutt infeksjon diskuteres, med det motsatte forholdet – en tidligere påført infeksjon.

Tilstedeværelsen av ett eller flere av følgende tegn indikerer akutt primærinfeksjon:

• anti-VCA IgG (oppdages tidlig, og senere synker innholdet);
• høy titer (mer enn 1:320) eller 4-dobling av anti-VCA IgG-titer i løpet av sykdomsforløpet;
• forbigående økning i anti-EA-D-titer (1:10 eller mer);
• tidlig anti-VCA IgG uten anti-EBNA, og senere fremveksten av anti-EBNA.

Akutt eller primær infeksjon forårsaket av Epstein-Barr-viruset utelukkes dersom titrene av anti-VCA IgG og anti-EBNA i blodserumet ikke endres når de studeres dynamisk (i løpet av den akutte perioden og under rekonvalesensen).

Vedvarende tilstedeværelse av tidlig antigen og anti-VCA IgG i høye titere indikerer en kronisk infeksjonsfase.

Påvisning av antistoffer mot Epstein-Barr-viruset brukes til å diagnostisere infeksiøs mononukleose og kroniske infeksjoner forårsaket av Epstein-Barr-viruset.

Antistoffer mot Epstein-Barr-viruset kan påvises ved følgende sykdommer: sekundære immunsvikttilstander, inkludert HIV-infeksjon, nasofaryngealt karsinom, Burkitts lymfom, CMV-infeksjon, syfilis, Lyme-sykdom, brucellose, etc.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ]