Hepatitt B -virus

Hepatitt B er en smittsom sykdom hos en person som er kjennetegnet ved selektiv skade på leveren av et virus. Denne form for hepatitt er den farligste i konsekvensene blant alle kjente former for viral hepatitt. Den forårsakende agensen er hepatitt B-viruset (HBV).

Første antigenet av hepatitt B-virus har blitt oppdaget Blumberg B. I 1964 i serum australsk aborigine, og patogenet ble funnet i 1970, D. Dane (et al.), Og fikk navnet Dane-partikler, fordi det ikke var noen sikkerhet for at , at dette virkelig er et virus, ikke dets komponenter. Deretter forsvant all tvil, siden i danskpartiklene ble det funnet genomisk DNA og en viral DNA-avhengig DNA-polymerase. Virionen inneholder tre hovedantigener, for hvilke følgende betegnelser ble introdusert i 1974:

• HBsAg er et overflatisk, eller løselig, eller australsk antigen.
• HBcAg er et kjerneantigen (ko-antigen).
• HBeAg - e-antigenet, er lokalisert i kjernen av virionet og, i motsetning til HBcAg, ikke bare er til stede i virionet, men også sirkulerer i blodet i en fri form eller som et kompleks med den anti-HBeAg. Det blir utskilt i blodet fra hepatocyttene med aktiv replikering av HBV.

Overflateantigen - HBsAg - eksisterer i tre morfologisk forskjellige alternativer: 1) er superkapsid Helvirus; 2) i store mengder oppstår i form av partikler med en diameter på 20 nm, som har en sfærisk form; 3) i form av filamenter med en lengde på 230 nm. Kjemisk er de identiske. Sammensetningen har en total HBsAg-antigen og to par av innbyrdes eksklusive typespesifikke determinantene: d / y og w / r, så er det fire vesentlige subtype HBsAg (og således HBV): adw, adr, ayw og aur. Antigen a gir dannelsen av en felles kryssimmunitet mot alle subtypene av viruset.

Faktisk har virionen, Dain-partikkelen en sfærisk form og en diameter på 42 nm. Den superkapside av virionen består av tre proteiner: de viktigste (hoved), store og mellomstore. Genomet er innelukket i en kapsid og er representert ved et dobbeltstrenget ringformet DNA med en masse på 1,6 MD. DNA består av ca 3200 nukleotider, men dets "plus" -non er 20-50% kortere enn minustegnet. Med 5'-enden av det lange filamentet er det virus-spesifikke proteinet kovalent bundet. 5'-enden av begge trådene er komplementære og danner "klebrige" sekvenser på 300 nukleotider i lengden, slik at filamentene er lukket i en ring. Innholdet av G + C i virion-DNA er 48-49 mol%. I kjernen av virionen er det i tillegg til genomisk DNA-viral DNA-avhengig DNA-polymerase. Den "minus" -definale DNA av HBV inneholder bare fire gener (S, C, P og X), men de er organisert svært kompakt. Generene S, C, P, X sterkt overlapper og styrer syntesen av de følgende produktene. Gene S koder for syntesen av hovedbelegget protein og inneholder all informasjon om overflateantigenet av HBsAg. I tillegg koder det for syntese av mellomstore og store konvoluttproteiner. Proteiner inneholder en felles COOH-terminus, men deres oversettelse begynner med tre forskjellige initiatorkodoner. Gene C koder for syntesen av kapsidproteiner (HBcAg og HBeAg); Selv om disse proteinene er kodet av ett gen, er måtene til oversettelsen forskjellige. Gene P er den største. Den inneholder en del av alle tre andre gener og koder for enzymer som er nødvendige for replikasjon av viruset. Spesielt koder den for revers transkriptase, domenet til enzymet RNA-ase H, det 5'-terminale protein av "minus" -kjeden. Gene X-koder for proteiner som regulerer uttrykket (ekspresjon) av alle virusgener, spesielt et protein med en masse på 17 kD, som er en gentransskriptjonstransaktivator.

Proteiner som danner et overflateantigen finnes i glykosylert (gp) og ikke-glykosylert form. Glykosylert er gp27, gp33, gp36 og gp42 (tallene er betegnet med m i kD). Supercapsid HBV består av hoved- eller grunnleggende S-protein (92%); gjennomsnittlig M-protein (4%) og stort eller langt L-protein (1%).

• Hovedproteinet, p24 / gp27, eller hovedproteinet (protein S), er hovedkomponenten i HBV-konvolutten. I fravær av andre skallproteiner polymeriserer og dannes det sfæriske partikler med en diameter på 20 nm, som består av 100 polypeptidmolekyler.
• Et stort protein, p39 / gp42, eller et langt protein (L protein), er tilstede i alle tre former for HBsAg. Det spiller en viktig rolle i morfogenesen av virioner og i deres utgang fra cellen. L-proteinet inneholder sekvensen av M-proteinet, som er supplert med N-endesekvensene av 108 (ayw), eller 119 (adw, adr, ayr) aminosyrerester som er kodet NPE-Sl-S-gen-området.
• Midterproteinet - gp33 / gp36, eller proteinet M, er også tilstede i alle tre morfologiske former av HBsAg. Proteinet M inneholder ved N-terminalen et område på 55 aminosyrerester kodet av før-52-regionen av S-genet. Det antas at dette nettstedet spiller en viktig rolle i anerkjennelsen av hepatitt B-virus av leverceller av et begrenset vertsområde (human, chimpanseeaben). Proteinsekvensene kodet av S-gen npe-S-regioner har høy immunogenicitet, og deres determinanter er lokalisert på overflaten av virionen. Derfor spiller antistoffer mot disse antigenene en viktig rolle i dannelsen av immunitet mot hepatitt B.

Syntese av virale proteiner styres tett på nivået av transkripsjon og oversettelse. I transkripsjonen av virusgenomet syntetiseres to typer mRNA:

• en mindre - 2100 nukleotider - koder for membranets hoved- og mellomproteiner;
• store - 3.500 nukleotider, dvs. Lengre enn selve genomisk DNA; den inneholder terminale gjentagelser på 100 nukleotider i lengde.

Denne typen mRNA koder for kapsidproteinet og produktene av P-genet. Det er også en mal for virus-DNA-replikasjon. Som en del av genomet, er det forsterkere (transkripsjonsforsterkere) - regulatoriske elementer som aktiverer uttrykket for alle virusgener og virker primært i leverceller. Spesielt uttrykkes gen S på svært høyt nivå bare i leverceller og under påvirkning av steroidhormoner. Denne tilstanden forklarer hvorfor kronisk hepatitt B og leverkreft (hepatom) blir observert hos menn oftere enn hos kvinner som har et lavere nivå av steroidhormoner.

Andre regulatoriske elementer i hepatitt B-viruset modulerer (kontrollerer) nivåene av syntese av individuelle proteiner. For eksempel syntetiseres et stort protein bare i små mengder. Mesteparten av det på overflaten av smittsomme virioner. Og hovedproteinet og i mindre grad syntetiseres midterproteinet i store mengder, og la cellene i overflateantigenpartiklene, som i serum inneholder mange ganger mer enn de modne virioner. Antall overflateantigenpartikler kan være 1011-1013 per 1 ml blod (flere hundre μg).

Hepatitt B-virus er isolert i en ny virusfamilie - Hepadnaviridae, slekt Orthohepadnavirus. Lignende hepadnaviruser ble funnet i forskjellige dyr (jordproteiner, marmoter, spøkler, Peking-dukker).

Reproduksjon av hepadnavirus foregår på en uvanlig måte. Spesielt forekommer replikasjonen av genomisk DNA gjennom mellomleddet-RNA, dvs. Med mekanismen for revers transkripsjon.

Livssyklusen til hepatitt B-viruset.

• Adsorbsjon på cellen.
• Penetrasjon inn i cellen via reseptorformidlet endocytose mekanisme (avgrenset grop -> grenset ampulle -> lysosomet -> nukleokapsid utgang og inngang av det virale genomet inn i hepatocytter kjernen).
• Intracellulær reproduksjon.

Under penetrasjonen i cellen forlenges den korte ("pluss") DNA-kjeden (fullfører). I kjernen syntetiserer den cellulære DNA-avhengige RNA-polymerasen et RNA på 3.500 nukleotider (pregener) og mindre mRNAer for syntese av virale proteiner. Derefter pakkes pregenet og den virale DNA-polymerase inn i et nylig syntetisert kapsid, som overføres til cytoplasma. Her forekommer revers transkripsjon av pregenoma. Det syntetiserer et nytt "minus" -definer-DNA. Etter at syntesen av minus-DNA er fullført, blir det pregenomiske RNA ødelagt. Virion-DNA-polymerasen på "minus" -kjeden syntetiserer et "pluss" -kjede. Viral DNA, som nå er dobbeltstrenget, kan eksistere i cellen i ganske lang tid og returnere til kjernen for neste replikasjons syklus. Hvis den nye viruspartikkel ikke blir utsatt for ytterligere replikasjon, nukleokapsidet som dannes ved å passere gjennom cellemembranen, dekket superkapsidom, knopp fra cellen, og det er umiddelbart stoppes kort forlengelse av "plus" -kjeden DNA. Derfor varierer lengden på denne tråden. I en typisk akutte form av hepatitt B-serologiske markører følgende sekvensielt fremkomme i blodet: HBsAg, HBeAg og antistoffer (IgM, IgG): anti-HBcAg. Anti-HBeAg og anti-HBsAg.

Sammensetningen av hepatitt B-virus har onkogen, men fant at, å trenge inn i cellekromosomet (i dens forskjellige deler), kan det virale DNA bli indusert i dem annen genetisk regulering - delesjon, translokasjon, forsterkning, noe som kan føre til utvikling av leverkreft - ett av de alvorligste konsekvensene av viral hepatitt B.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7], [8],

Resistens av hepatitt B-viruset

Hepatitt B-viruset er svært motstandsdyktig. Ved romtemperatur forblir det levedyktig i 3 måneder, i frosset tilstand - i flere år. Viruset er fullstendig inaktivert ved autoklavering (120 ° C) ved tilbakeløp i 30 min, med tørr varme ved en temperatur på 180 "C i 60 minutter, ved 60 ° C -. I 10 timer bestandige i surt medium, men blir ødelagt i et alkalisk. Viruset dør når det behandles med H202, kloramin, formalin, fenol og med UV-bestråling.

Patogenese og symptomer på hepatitt B

Viruset injiseres hematogent direkte inn i leveren. I patogenesen av hepatitt spiller autoimmune humorale og cellulære responser en viktig rolle. Det antas at den hepatocytter tapet på grunn ikke så mye til den direkte virkning av selve viruset, men med verts immunologiske reaksjoner som oppstår i forbindelse med den modifikasjon av cellemembranen av virale proteiner som induserer utseende av autoantistoffer til leverceller. Derfor kan utvikling av kronisk hepatitt og levercirrhose betraktes som en autoimmun sykdom.

Cellulære autoimmune reaksjoner på virale proteiner inneholdt i hepatocytmembranen medieres av T-cytotoksiske lymfocytter og andre levermordceller. Derfor kan akutt dystrofi av leveren betraktes som en reaksjon av avvisning av et merkelig heterograft.

Inkubasjonsperioden varer fra 45 til 180 dager, i gjennomsnitt 60 til 90 dager. Det kliniske løpet av hepatitt B er preget av stort mangfold; sykdommen kan oppstå: i latent form, oppdages bare ved laboratoriemetoder, i en typisk isterisk form og i en malign form som slutter dødelig. Varigheten av det prejouriserte scenen varierer fra en dag til flere uker. Ikteriske periode er vanligvis lang, og er karakterisert ved veldefinerte symptomer (gulsott, hyperbilirubinemi, mørk urin, gulsott sclera). Langvarig formen er observert hos 15-20% av pasientene og 90% av dem utvikler kronisk hepatitt B. Pasienter med kronisk skjema hyppig observerte autoimmune prosesser er ledsaget av et høyt innhold av protivopechenochnyh antistoffer som blir detektert ved hjelp av enzymbundet immunosorbent assay (IPM). Hos barn er hepatitt B mild og ofte uten gulsott, hos små barn - for det meste asymptomatisk.

Postinfeksjonell immunitet (humoral og cellulær) er lang, livslang, på grunn av virusneutraliserende antistoffer (anti-HBsAg) i fravær av et overflateantigen i blodet. Ofte observert latent immunisering på grunn av gjentatt kontakt med HBV, som er årsaken til utbredt immunitet mot viruset blant befolkningen. Vanligvis gjenstår pasienter med akutt form for hepatitt B helt ettersom antistoffene akkumuleres til det. Imidlertid, i noen tilfeller, til tross for det høye nivået av virusantigen i blodet (en omstendighet som forklarer hvorfor parenteral infeksjon forekommer oftest), blir det ikke dannet antistoffer mot det. Viruset forblir i leveren, og en person i lang tid, noen ganger for livet, blir en kronisk bærer. Denne tilstanden er tydeligvis forbundet med svak immunrespons. En av de vanligste utfallene av kronisk hepatitt B er skrumplever og leverkreft, som utvikler seg etter en latent periode på opptil 30-50 år.

Epidemiologi av hepatitt B

Kilden til infeksjon med hepatitt B-viruset er bare en person. I motsetning til tidligere fremstillinger som infeksjon med hepatitt B-virus skjer utelukkende på parenteral måte, er nå påvist at det er funnet i forskjellige sekreter og ekskreter :. Spytt, nese-svelg-sekreter, avføring, tårevæske, sæd, menstruasjonsblod, etc. Slik infeksjon oppstår ikke bare parenteralt, men også seksuelt og vertikalt (fra mor til foster), t. E. Praktisk talt infeksjon med hepatitt B-virus kan på mange måter.

Hepatitt B i verden drepte så mange mennesker som i alle årene av andre verdenskrig. Antall bærere av HBV, ifølge WHO, er fra 0,1 til 20% av befolkningen i forskjellige land eller regioner.

[9], [10], [11], [12], [13], [14], [15], [16],

Diagnose av hepatitt B

Foreløpig er hovedmetoden for å diagnostisere hepatitt B bruk av en reversibel passiv hemagglutineringsreaksjon (ROSGA) for å oppdage et virus eller dets overflateantigen, HBsAg. Som allerede nevnt inneholder blodet av overflateantigenet mange ganger mer enn selve viruset (100-1000 ganger). For reaksjonen av ROPGA er erytrocytter sensibilisert med antistoffer mot hepatitt B-viruset. Hvis det er et antigen i blodet, oppstår en hemagglutineringsreaksjon. ROPGA er enkel, praktisk, veldig spesifikk. For å oppdage antistoffer mot HBsAg-virusantigenet, anvendes forskjellige immunologiske metoder (DSC, RPGA, IFM, RIM, etc.). I tillegg brukes PCR-varianter til å oppdage HBV og dets antigener.

Ulike immunologiske metoder kan brukes til å detektere antistoffer mot virusantigenet (HBsAg) i pasientens serum (DSC, RPGA, utfellingsreaksjon, IFM, RIM, etc.).

[17], [18], [19], [20], [21], [22],

Spesifikk forebygging av hepatitt B

Med tanke på den høye forekomsten av hepatitt B, og at det er mange HBV-bærere i verden, er WHO-vaksinasjoner mot hepatitt B obligatoriske og må utføres i det første år av livet. To typer vaksiner foreslås for vaksinering. For å forberede en av dem blir plasma av virusbærere brukt som råmateriale, siden virusantigenet i den er inneholdt i mengder som er tilstrekkelig til å fremstille vaksinen. Hovedbetingelsen for fremstilling av denne type vaksine er deres fullstendige sikkerhet, dvs. Fullstendig inaktivering av viruset, som er tilveiebragt ved hjelp av vaksinepreparasjonsteknologi. For å fremstille en vaksine av en annen type, benyttes genetiske metoder, særlig en rekombinant klon av gjær som produserer overflateantigenet av hepatitt B-viruset, brukes til å fremstille det antigene materialet.

Begge vaksinene er svært effektive (beskytter 95% av vaksinert). Varigheten av postvaccinal immunitet er ikke mindre enn 5-6 år. Vaksiner er opprettet for både voksne og spedbarn og små barn - den viktigste komponenten i den globale kampen mot hepatitt B. Det fulde løpet av vaksinasjon består av tre injeksjoner:

Jeg doser - umiddelbart etter fødselen; II dose - etter 1-2 måneder; III dose - til slutten av det første år av livet.

Disse vaksinene som inngår i den ekspanderte programnøkkels for immunisering, WHO og på linje med kalender med dens gjennomføring (i henhold til WHO-anbefalinger på den første leveåret utføres vaksinering mot tuberkulose, polio, hepatitt B, meslinger, stivkrampe, difteri, kikhoste).

Gammaglobulin, som inneholder antistoffer mot HBV, brukes til nødpassiv immunoprofylakse til personer som har hatt kontakt med en hepatitt B pasient.

For å behandle hepatitt B (akutt og kronisk form) bruk interferon og amixin (for induksjon av sin endogene syntese). Ved behandling av kronisk hepatitt B er et nytt legemiddel lamivudin (syntetisk nukleosid) effektivt.