Vitamin A i blodet

Referanseverdier (normale) nivåer av vitamin A (retinol) i blodserum: barn 1-6 år - 0,7 til 1,5 mol / L, 7-12 - 0,91-1,71 mmol / l, 13 -19 år - 0,91-2,51 μmol / l; hos voksne er det 1,05-2,09 μmol / l.

Vitamin A er knyttet til lipo og foreligger i to former - selve vitamin A eller retinol (som bare finnes i animalske produkter) og pro-vitamin A, kjent som karoten (fremstilt fra animalsk eller vegetabilsk opprinnelse), som kan omdannes til retinol i veggene fordøyelseskanalen. Omtrent 50-90% av retinol innkommende mat absorberes i tynntarmen og transporteres i chylomikroner forbundet med komplekset til leveren, hvor den lagres i form av retinolpalmitat. Om nødvendig blir det frigjort i blodet i form av retinol, som er i kombinasjon med vitamin A-bindende protein. I serum binder vitamin A-bindende protein + retinolkomplekset seg til transthyretin. Fra serum fanges retinol av målceller, som retinale fotoreceptorer og epitel.

Når vitamin A kommer inn i kroppen som overstiger kravene (180-430 μg retinol per dag avhengig av alder, kjønn og fysiologisk tilstand), blir dets overskudd deponert i leveren som danner depotet av dette vitaminet. Med redusert inntak av retinol fra mat slippes leverleverandørene inn i blodet, og holder retinolkonsentrasjonen i serum på et normalt nivå (over 0,7 μmol / L). Andre biologisk aktive former for vitamin A (retinal og retinsyre) er tilstede i blodet i svært lave konsentrasjoner (under 0,35 μmol / L); på estere av retinol står for ca 5% av totalt vitamin A (0,1-0,1 μmol / l).

Vitamin A har en viktig rolle i oksidasjonsreduserende prosesser. Retinol fremmer dannelsen av glykogen i leveren og musklene, forbedrer blodkolesterol er involvert i syntesen av steroid og kjønnshormoner. Det er nødvendig for vekst og dannelse av ben skjelett resyntese av rhodopsin, og bidrar også til normal funksjon av slimhinner og epitelet i huden deksel, og hindrer dens metaplasi, hyperkeratose og overdreven avskalling. Vitamin A bidrar til å styrke hår, tenner og tannkjøtt. I de senere år, viser variert rolle til vitamin A i forebygging av kreft og regulering av immunitet (avgjørende for gjennomføringen av fagocytose, øke syntesen av Ig, stimulerer produksjonen av drepe-T-celler, stimulerer T-hjelper type II et al.). Vitamin A - En aktiv antioksidant, som hovedsakelig virker i nærvær av vitamin E; det beskytter vitamin C mot oksidasjon. Mangel på vitamin A regnes som en risikofaktor for ondartede neoplasmer. I eksperimentelle studier ble det vist at en økning i vitamin A-innholdet i dietten øker medianvarigheten av livet med 17,5%. Sink er en viktig kofaktor for vitamin A metabolisme (nødvendig for syntese av vitamin A-bindende protein).

Det gjennomsnittlige daglige kravet til retinol for voksne (20-50 år) er 1,2 mg (4000 IE, 1 IE tilsvarer 0,3 μg retinol), for gravide - 1,5 mg (5000 IE) til amming - 1, 8 mg (6000 IE), for personer over 60 år - 2,5 mg (10 000 IE). Minst en tredjedel av det daglige kravet til retinol skal leveres til kroppen i ferdig form. Resten kan absorberes ved bruk av karotenoider, hvorav retinol dannes i kroppen. Det skal huskes at ca. 30% av retinol i matvarer er ødelagt av varmebehandlingen. Virkningen av retinol er 2 ganger høyere enn karoten, i tillegg er sistnevnte bare 30-40% absorbert i tarmen. Ved vurderingen av diettinntaket anses det derfor at 1 mg retinol tilsvarer omtrent 6 mg karotenoider.

Bestemmelse av retinol (vitamin A) og karotenoider i serum ifølge Bessey i modifikasjonen av LA Anisimova

Prinsipp for metoden

Bestemmelsen av vitamin A og karotenoider er basert på hydrolyse i en alkalisk alkoholoppløsning, etterfulgt av ekstraksjon med en blanding av organiske løsningsmidler.

Reagenser

• 11 M løsning av kaliumhydroksyd (KOH).
• 96% etylalkohol.
• 1 M oppløsning av kaliumhydroksyd (KOH) i 96% etylalkohol: 1 volum 11 M KOH-oppløsning blandes med 10 volumer 96% etylalkohol. Reagenset fremstilles på dagen for studien. Hvis det oppstår flekker under blanding, må alkoholen rengjøres ved destillasjon før bruk.
• Xylol, hk.
• Oktan, h.ch.
• Xylenoktanblanding: Fremstilt ved å blande like mengder xylen og oktan.

Undersøkelsene utføres på et spektrofotometer.

Forløpet av bestemmelsen av vitamin A

Blod tatt fra fingeren (ca. 1 ml) blir introdusert i sentrifugemerken og plassert i en glasskopp med varmt vann (temperatur 40-45 ° C) i 20-30 minutter. For å skille serumet, blir en blodpropp forsiktig såret rundt kanten av røret med en tynn glassstang og sentrifugert ved 3000 rpm i 10 minutter.

Velg 0,12 ml serum og overfør det til et agglutineringsrør, og tilsett deretter 0,12 ml av en 1 M alkoholkaliumhydroksydløsning. Innholdet ristes grundig.

Testrør med prober plasseres i et vannbad i 20 minutter ved en temperatur på 60 ° C for hydrolyse.

Prøvene avkjøles og 0,12 ml av en xylenoktanblanding tilsettes til dem, ristes kraftig i 10-15 sekunder. Cool igjen og sentrifuger.

Fjern forsiktig det øverste laget som inneholder vitamin A og karotenoider med en Pasteur pipette med en gummikanne og overfør den til mikrokuvetter.

Prøver er spektrofotometriske ved en bølgelengde på 328 nm - for å bestemme vitamin A og ved en bølgelengde på 460 nm - for å bestemme karotenoider.

Etter spektrofotometri den undersøkte prøve utsettes for ultrafiolett bestråling for destruksjon av vitamin A. For dette formål, i en avstand på 15-20 cm fra kvarts kyvettene innstilt (baktericid) lampe slik at bestrålingen eksponerte del av kyvetten, som er fylt med væske; eksponeringstiden på 45-60 minutter.

Prøvene er gjentatte ganger spektrofotometriske ved en bølgelengde på 328 nm. Innholdet av vitamin A bestemmes av forskjellen i utryddelsesverdier (optisk tetthet), med tanke på koeffisienten (faktor) 637, beregnet av Bessey for vitamin A.

Beregningen utføres i henhold til formelen:

X = 637 × (Е328 (1) - Е328 (2)),

Hvor X er vitamin A-innholdet, μg / dL; 637 er koeffisienten beregnet av Bessey for bestemmelse av vitamin A; Е328 (1) - Optisk tetthet av løsningen før bestråling; E328 (2) er den optiske tettheten av oppløsningen etter bestråling.

Koeffisienten for overføring av konsentrasjonen av vitamin A fra μg / dL i μmol / l er 0,035.

Innholdet av karotenoider beregnes med formelen:

X = 480-Е480,

Hvor X er innholdet av karotenoider, μg / dL; 480 er koeffisienten beregnet av Bessey for å bestemme karotenoider; E480 er den optiske tettheten av testløsningen.

Bemerkning

Ifølge Bessey kan større eller mindre serumvolumer tas under studiene, men forholdet til volumet av alkoholoppløsningen bør være konstant med enhver endring i volumet (mengden) av xylenoktanblandingen.

Normen i innholdet av vitamin A i blodserumet er: hos nyfødte og spedbarn - 160-270 μg / l; hos voksne, 1,05-2,45 μmol / l (300-700 μg / l). Innholdet av karotenoider i det voksne serum er 800-2300 μg / l.