Medisinsk ekspert av artikkelen
Nye publikasjoner
Southern blotting
Sist anmeldt: 05.07.2025
Alt iLive-innhold blir gjennomgått med medisin eller faktisk kontrollert for å sikre så mye faktuell nøyaktighet som mulig.
Vi har strenge retningslinjer for innkjøp og kun kobling til anerkjente medieområder, akademiske forskningsinstitusjoner og, når det er mulig, medisinsk peer-evaluerte studier. Merk at tallene i parenteser ([1], [2], etc.) er klikkbare koblinger til disse studiene.
Hvis du føler at noe av innholdet vårt er unøyaktig, utdatert eller ellers tvilsomt, velg det og trykk Ctrl + Enter.
Southern blotting (utviklet av E. Southern og R. Davis i 1975) er den viktigste metoden som brukes for tiden for å identifisere gener for en bestemt sykdom. For å gjøre dette ekstraheres DNA fra pasientens celler og behandles med en eller flere restriksjonsendonukleaser. De resulterende fragmentene utsettes for elektroforese, som gjør at de kan separeres etter størrelse (mindre fragmenter beveger seg raskere gjennom porene i gelen). Fragmentene overføres (trykkes på nytt) til et nitrocellulosefilter, hvor en radioaktivt merket probe legges lagvis. Proben binder seg kun til den komplementære sekvensen. Deretter bestemmes posisjonen til det ønskede fragmentet av genomisk DNA på elektroferogrammet ved hjelp av autoradiografi.
Hybridisering med en merket DNA-probe av DNA- eller RNA-preparater påført dråpevis på en fast matrise uten forutgående restriksjon og elektroforese kalles punkt- eller spaltehybridisering, avhengig av konfigurasjonen av DNA-flekken på filteret (henholdsvis rund eller avlang).
[