Medisinsk ekspert av artikkelen
Nye publikasjoner
Polymerasekjedereaksjon (PCR) i diagnostisering av infeksjonssykdommer
Sist anmeldt: 05.07.2025
Alt iLive-innhold blir gjennomgått med medisin eller faktisk kontrollert for å sikre så mye faktuell nøyaktighet som mulig.
Vi har strenge retningslinjer for innkjøp og kun kobling til anerkjente medieområder, akademiske forskningsinstitusjoner og, når det er mulig, medisinsk peer-evaluerte studier. Merk at tallene i parenteser ([1], [2], etc.) er klikkbare koblinger til disse studiene.
Hvis du føler at noe av innholdet vårt er unøyaktig, utdatert eller ellers tvilsomt, velg det og trykk Ctrl + Enter.
PCR er en av DNA-diagnostiske metoder som gjør det mulig å øke antall kopier av den detekterte delen av genomet (DNA) til bakterier eller virus med millioner av ganger ved hjelp av enzymet DNA-polymerase. Den testede delen av nukleinsyre som er spesifikk for et gitt genom, multipliseres (amplifiseres) mange ganger, noe som gjør det mulig å identifisere den. Først deles DNA-molekylet til bakterier eller virus i to kjeder ved oppvarming, deretter binder de seg til komplementære deler av DNA i nærvær av syntetiserte DNA-primere (nukleotidsekvensen er spesifikk for genomet som bestemmes), og den andre kjeden av nukleinsyre syntetiseres etter hver primer i nærvær av termostabil DNA-polymerase. To DNA-molekyler oppnås. Prosessen gjentas mange ganger. Ett DNA-molekyl, dvs. én bakterie eller viruspartikkel, er nok for diagnostikk. Innføringen av et ekstra trinn i reaksjonen - DNA-syntese på et RNA-molekyl ved hjelp av enzymet revers transkriptase - gjorde det mulig å teste RNA-virus, som HCV-viruset. PCR er en tretrinnsprosess som gjentas syklisk: denaturering, primerbinding, DNA-syntese (polymerisering). Den syntetiserte mengden DNA identifiseres ved ELISA eller elektroforese.
PCR kan bruke ulike biologiske materialer – blodserum eller plasma, urethral skraping, biopsi, pleuravæske, cerebrospinalvæske, osv. PCR brukes primært til å diagnostisere infeksjonssykdommer som viral hepatitt B, viral hepatitt C, viral hepatitt D, CMV-infeksjon, seksuelt overførbare infeksjoner (gonoré, klamydia, mykoplasma, ureaplasma-infeksjoner), tuberkulose, HIV-infeksjon, osv.
Fordelen med PCR i diagnostisering av infeksjonssykdommer fremfor andre forskningsmetoder er som følger:
- det smittsomme agensen kan påvises i ethvert biologisk miljø i kroppen, inkludert materiale innhentet under en biopsi;
- det er mulig å diagnostisere smittsomme sykdommer i de tidligste stadiene av sykdommen;
- det er mulig å kvantitativt evaluere forskningsresultatene (hvor mange virus eller bakterier som finnes i materialet som studeres);
- Metodens høye følsomhet; for eksempel er PCR-følsomheten for påvisning av hepatitt B-virus-DNA i blod 0,001 pg/ml (omtrent 4 × 10² kopier /ml), mens følsomheten til DNA-hybridiseringsmetoden som bruker forgrenede prober er 2,1 pg/ml (omtrent 7 × 10² kopier /ml).
[