Immunhistokjemiske markører ved diagnostisering av precancerøse lesjoner i munnslimhinnen og rød kant på leppene

Tidlig og effektiv diagnostisering av neoplastiske lesjoner i munnslimhinnene (CRS) og den røde leppfeltet (CCG) forblir et alvorlig problem med onkostostologi. Kombinert cellekarsinom i munnhulen okkuperer sjetteplassen i verden i frekvens blant maligne svulster av alle lokaliseringer. I Russland er forekomsten av ondartede neoplasmer i munnhulen 2-4% av det totale antallet maligne tumorer hos mennesker.

I de siste årene har strukturen av sykdommer i munnslimhinnen blitt gjennomgått betydelige endringer, særlig en økning i andelen av prekancerøse sykdommer. I denne forbindelse er den effektive, ikke-invasive påvisningen av tegn på malignitet, fortsatt en tvingende oppgave innen tannlegen.

Til tross for den tilsynelatende enkelhet av klinisk avbilding prediktor for endring av den orale mukosa og CGC i forbindelse med ytre lokalisering, bestemmelse nosologisk forstadium for kreft, bare basert på det inntrykk ved inspeksjon og palpasjon, fører ofte til diagnostiske feil har varierende grader av forhorning eller sårdannelse og med markornyh elementer nederlag gjør dem vanskelige å skille mellom. Spesielt vanskelig tidlig diagnostisering av kreft, siden dens kliniske symptomer litt senere faktisk skjedde malign transformasjon.

Således har forskningen fra V.P. Kharchenko et al. Det er vist at mer enn 2/3 av pasientene på tidspunktet for behandling i medisinsk institusjon og etablering av diagnosen har III-IV stadier av sykdommen. En av årsakene til sen behandling er "uskarphet" av det kliniske bildet i begynnelsen av sykdommen. I tillegg har det blitt bevist behovet for å gjennomføre organisatorisk og metodologisk arbeid og øke nivået av kunnskap om tannleger om de tidlige kliniske manifestasjonene av forstadier i munnslimhinnen. Testing har avdekket at bare 42,8% av tannleger skille de tidlige tegn på munnslimhinnen kreft, kan 4,2% av respondentene korrekt gjennomføre primære diagnostiske tiltak for å oppdage kreft i denne lokaliseringen.

Andelen uhelbredelige former for kreft i munnslimhinnen på grunn av diagnostiske feil, ifølge ulike forfattere, når 58,4-70%. Situasjonen er komplisert av de uløste problemene med klinisk diagnose av forløper, særlig vanskeligheten ved å differensiere starten av malignitet, samt problemet med å velge en metode for behandling av en før-svulst sykdom. Det finnes ingen absolutte og relative indikasjoner på biopsi, spesielt i stadier av konservativ behandling. Hittil er det ikke et eneste eksempel i litteraturen om det diagnostiske kriteriet for det kliniske nivået som en tannlege kunne henvise til når man velger en egnet metode for behandling av en bestemt førtumorsykdom.

Oppløsning av diagnostiske vansker de fleste forfattere ser i hjelpediagnostiske metoder (cytologi, cheilostomatoskopi, biomikroskopi, optisk koherensomografi). Imidlertid er disse metodene ganske subjektive, siden de bare bærer beskrivende karakter av kvalitative endringer i de berørte vevene. En måte å kvantifisere morfologiske endringer på er å bestemme immunhistokjemiske markører.

Innføringen inn i daglig praksis av moderne tumor morfologiske verifisering metoder har i høy grad forbedret kvaliteten på diagnose og behandling av maligniteter. Metode muligheter for moderne molekylær onkologi utvidet for tiden ved hjelp av immunhistokjemiske studier kan bestemme ikke bare den histologisk diagnose av tumoren, men også for å gi den morphofunctional egenskaper i form av aggressivitet og prognose i forhold til forstadier til kreft og kreft har allerede utviklet.

Ifølge moderne ideer er grunnlaget for ondartet transformasjon av celler aktiveringen av enkle eller flere cellulære onkogener eller suppressorgener. Det observeres hos 30% av kreftformer i mennesker og kan i mange tilfeller oppdages immunohistokemisk. Onkogener ras p21, HER2 / neu, bcl-2 og suppressorgener p53 og Rb i forskjellige tumorer er blitt studert. Noen av de listede onkogenene (og suppressorgenene) er uavhengige prognostiske og prediktive tegn.

Epitelet av munnslimhinnen er lokalpredifeksjonen av dannelsen av kreftvulster. Eksterne faktorer (traumatiske okklusjon områder, de skarpe kanter av restaurasjoner insolvent ortopedisk utforming, irrasjonell individuell oral hygiene, inflammatoriske og destruktiv periodontal lesjoner) kan i tillegg til genetiske (arvelige) faktorer spille en rolle i å forårsake kreft i denne lokaliseringen. I utviklingen av karsinomer i munnslimhinnen skade kan være involvert i mekanismene for kontroll prosesser epitelial hyperplasi og skjell-metaplasia.

Morfologiske trekk ved munnslimhinnen epitel ved malignitet assosiert med en forandring i et sett av differensiering (fenotype cytokeratin primært epitellaget) markører CEA ekspresjon, så vel som markør spredning Ki - 67.

P53 er et tumor suppressor-gen, hvor proteinproduktet er en nukleær transkripsjonsfaktor med mange funksjoner, inkludert blokkering av passasjen av celler gjennom cellesyklusen og induksjon av apoptose. P53-proteinet uttrykkes i alle celler i kroppen. I fravær av skade på det genetiske apparatet er p53-proteinet i en inaktiv tilstand, og når DNA-skade oppstår, aktiveres DNA'et. Aktivering består i å anskaffe evnen til å binde til DNA og aktivere transkripsjon av gener som inneholder en nukleotidsekvens i regulatorisk region, som er betegnet av p53-responselementet. Mutasjon av p53 i celler som forekommer omtrent 50% av kreft, fører til proteinsyntese med tap av dens funksjoner, men å ha en høy stabilitet og akkumuleres i kjernen som immunohistochemically uttrykt i en distinkt nukleær farging.

Den "ville" typen av wt-53 onkosuppressorgenet og p53-proteinet kodet av den, spiller en sentral rolle i utviklingen av apoptose. Når DNA er skadet, oppstår uttrykk for wt53-genet og det tilsvarende protein. Siste blokkene cellesyklus i G1-S-fasen, og derved hindre ytterligere replikasjon av skadet DNA som er syntetisert i S-fasen, og skaper betingelser for fjerning av det skadede området og reparasjon dens modifiserte del. Hvis reparasjon oppstår, fortsetter cellen å dele og gi generasjon av friske celler. Imidlertid, hvis reparasjon ikke forekommer, innbefattes andre mekanismer som sikrer ødeleggelse av en slik celle med skadet (mutagent) DNA, dvs. Det genetiske programmet for celledød utvikler seg - apoptose.
I de senere år har det vært antydet at p53-status kan være avgjørende for å bestemme sensitiviteten til en tumor for kjemo- og radioterapi. Bekreftelse av denne hypotese er mange studier som viser at mutert p53 er en faktor av dårlig prognose og ineffektivitet av adjuvant terapi i forskjellige tumorer i munnslimhinnen.

Markører for spredning er også en svært informativ diagnostisk verdi ved å forutse sykdomsforløpet. Proliferativ aktivitet er en ledende faktor både i mekanismen for ondartet transformasjon av celler og i den biologiske oppførelsen av allerede fremvoksende tumorer. En lovende markør for proliferativ aktivitet er Ki-67 antigenet, som uttrykkes praktisk talt i alle faser av cellesyklusen og reflekterer følgelig størrelsen på det proliferative bassenget. Genet som koder for Ki-67 er plassert på den lange armen av 10-kromosomet. Ki-67 refererer til regulatoriske proteiner. Dets utseende faller sammen med inngangen av cellen til mitose, noe som gjør det mulig å bruke det som en universell markør for spredning i evaluering av veksten av ondartede svulster.

En rekke studier som undersøker den diagnostiske verdien av immunhistokjemiske markører for å forutsi strømmen av forstadier til kreft i munnslimhinnen og vermiliongrensen. Murti PR et al. Studerte uttrykket av p53 med rød flatrate SSRI. Når den immunohistokjemiske metoden ble bestemt, kunne ikke uttrykk av p53 avsløre den ondartede statusen til forløperen av munnslimhinnen. Forfatterne foreslo at overekspresjon av p53 topp tid nær tidspunktet for transformasjon til forstadier til kreft, og kan ikke brukes som en tidlig markør for malignitet forutsigelse forstadium for oral mucosa. Andre forskere fant at det humane gen TP53 koder for minst 9 forskjellige isoformer. Et annet medlem av p53-familien, p63, inneholder 6 forskjellige isoformer og spiller en nøkkelrolle i utviklingen av munnslimhinnen, spyttkjertlene, tennene og huden. Det ble foreslått at p63 er assosiert med utviklingen av squamouscellekarsinom i hode og nakke. Imidlertid ble det ikke observert statistisk signifikante endringer i uttrykket av nye isoformer av p53 og p63 i forgjengeren av SSRI i sammenligning med umodifisert vev. Studier av De Sousa FA bekreftet den prognostiske signifikansen av p53-markøren ved å bestemme potensialet for ondartet transformasjon av forløperen til munnslimhinnen. Samtidig mener noen forfattere at p53 ikke kan brukes som en enkelt markør for å forutsi utviklingen av kreft.

Like lovende prognostisk immunohistokjemisk påvisning plan er representert i den undersøkte vevsprøver podoplanina - integral membran mucoprotein uttrykt som uforandret og den endrede inflammatoriske og neoplastiske endotelet av lymfatiske kapillærer. Forskere har funnet en statistisk signifikant sammenheng uttrykket podoplanina iABCG2 (ATP-bindende protein undergruppe G2) med risiko for malign transformasjon av lichen planus (risikoen var betydelig høyere med hensyn på samekspresjon podoplanina og ABCG2, enn uten samekspresjon podoplanina og ABCG2) og konkluderte med at podoplanin og ABCG2 kan brukes som biomarkører for vurdering av risikoen for malign transformasjon med forstadier til kreft RBCU

Forskninger fra utenlandske forskere bekreftet den diagnostiske betydningen av Fas / FasL uttrykk som biomarkører av kreftutvikling. Fas er et type I transmembran glykoprotein (synonymer APO-I, CD95), og induserer apoptose i celler etter interaksjon med Fas-ligand (FasL) eller agonistisk monoklonalt antistoff mot Fas.

Samtidig er det kjent at Fas uttrykkes i nesten alle typer vev. Økt Fas-uttrykk observeres i nyrene, leveren, hjertet og tymus. I tillegg er denne reseptoren uttrykt på mange svulster, så vel som virusinfiserte celler. Årsaken til resistansen av forskjellige celletyper til Fas-avhengig apoptose kan være økt produksjon av oppløselig Fas av disse cellene. Oppløselig Fas er et produkt av alternativ spleising og er i stand til å hemme apoptose indusert av agonistiske monoklonale antistoffer mot Fas eller FasL.

Således er tvetydig tolkning av resultatene av undersøkelser utført av forskjellige forfattere fører til den konklusjon at i det nåværende stadium i molekyl onkologi bruke immunohistokjemiske markør fremadrettet i kombinasjon med andre metoder for diagnose og prognose av premaligne lesjoner i munnslimhinnen.

Av særlig relevans er problemet med rangering av immunhistokjemiske markører for diagnostisk betydning. Vi tror at i rekkefølge av avtagende betydning kan de ordnes i følgende rekkefølge:

1. Immunohistokjemiske markører med høy diagnostisk betydning: subplanin, ABCG2, bcl-2;
2. Immunohistokjemiske markører med en gjennomsnittlig grad av diagnostisk betydning: Bax, MMP-9;
3. Lovende immunohistokjemiske markører, hvorav den diagnostiske signifikansen krever videre studier: MMP-2, MT1-MMP, Fas / FasL;
4. Immunohistokjemiske markører, den diagnostiske signifikansen av å forutsi løpet av forkjølsomme sykdommer, er ikke bevist: p53, p63.

Basert på denne analyse av litteraturdata kan det konkluderes at bestemmelsen av immunhistokjemiske markører ikke er å betrakte som den eneste fremgangsmåte for å forutsi forløpet av forstadier til kreft i munnslimhinnen og identifisering av risiko for malign transformasjon, men ikke desto mindre har fremgangsmåten en høy diagnostisk verdi i kombinasjon med annen metoder for å forutse løpet av forkjølsomme sykdommer.

Seniorforsker Kuznetsova Roza Gilevna. Immunohistokjemiske markører i diagnosen forkreftssår i munnens slimhinne og den røde grensen av leppene // Praktisk medisin. 8 (64) desember 2012 / volum 1

[1], [2], [3], [4], [5]