Hepatitt C PCR

HCV er vanligvis fraværende i materialet.

I motsetning til serologiske metoder for diagnostisering av viral hepatitt C, som påviser antistoffer mot HCV, tillater PCR å påvise tilstedeværelsen av HCV RNA direkte og kvantifisere konsentrasjonen i testmaterialet. Testen har artsspesifisitet og høy sensitivitet: ti HCV RNA-molekyler i testmaterialet er nok til å påvise den. Påvisning av antistoffer mot HCV bekrefter bare at pasienten er smittet, men tillater ikke å bedømme aktiviteten til den infeksjonsmessige prosessen (replikasjon av viruset) og prognosen for sykdommen. I tillegg påvises antistoffer mot HCV både i blodet til pasienter med akutt og kronisk hepatitt, og hos de pasientene som var syke og kom seg, og ofte dukker antistoffer i blodet opp bare flere måneder etter at det kliniske bildet av sykdommen har oppstått, noe som kompliserer diagnosen. Påvisning av HCV i blodet ved hjelp av PCR er en mer informativ diagnostisk metode. Påvisning av HCV RNA i PCR indikerer viremi, tillater å bedømme replikasjonen av viruset i kroppen og fungerer som et av kriteriene for effektiviteten av antiviral behandling. Påvisning av HCV-RNA ved PCR i tidlige stadier av virusinfeksjon i fullstendig fravær av serologiske markører kan tjene som det tidligste beviset på infeksjon. Isolert påvisning av HCV-RNA i fullstendig fravær av andre serologiske markører kan imidlertid ikke utelukke et falskt positivt PCR-resultat fullstendig. I slike tilfeller er en omfattende vurdering av kliniske, biokjemiske og morfologiske studier med gjentatt bekreftelse av infeksjon ved PCR nødvendig.

Bruken av PCR-metoden hos pasienter med kronisk viral hepatitt C er av stor betydning, siden de fleste av dem mangler en korrelasjon mellom tilstedeværelsen av virusreplikasjon og aktiviteten til leverenzymer. I slike tilfeller er det bare PCR som lar oss bedømme tilstedeværelsen av virusreplikasjon, spesielt hvis det endelige resultatet uttrykkes kvantitativt. I de fleste tilfeller av sykdommen skjer forsvinningen av HCV RNA fra blodserumet senere enn normaliseringen av leverenzymer, slik at normaliseringen av disse ikke kan tjene som grunnlag for å stoppe antiviral behandling.

Det er praktisk viktig å undersøke ikke bare blodserum, men også lymfocytter og hepatobiopsiprøver ved hjelp av PCR-metoden for å påvise HCV RNA. Virus kan påvises 2–3 ganger oftere i levervev enn i blodserum. Når man evaluerer resultatene av en blodserumtest for HCV RNA, bør man huske at viremi kan være varierende (samt endringer i enzymaktivitet). Derfor kan man få et negativt resultat etter positive PCR-testresultater, og omvendt. I slike tilfeller er det bedre å undersøke hepatobiopsiprøver for å avklare eventuelle tvil.

Påvisning av HCV RNA i materiale ved hjelp av PCR brukes til følgende formål:

• løsning av tvilsomme serologiske testresultater;
• differensiering av viral hepatitt C fra andre former for hepatitt;
• identifisering av sykdommens akutte stadium i sammenligning med tidligere infeksjon eller kontakt; bestemmelse av infeksjonsstadiet hos nyfødte fra HCV-seropositive mødre;
• overvåking av effektiviteten av antiviral behandling.

Pasienter med mistenkt viral hepatitt C:

• givere;
• personer med risikofaktorer;
• personer med forhøyet ALAT-aktivitet;
• pasienter med akutt hepatitt

Alle de ovennevnte funksjonene ved evaluering av resultater og tilnærminger til diagnostisering av HCV ved bruk av PCR gjelder også for andre infeksjoner.

PCR-metoden tillater ikke bare å detektere HCV RNA i materialet som studeres, men også å fastslå dets genotype. Bestemmelse av virusgenotypen er av stor betydning for utvelgelsen av pasienter med kronisk viral hepatitt C for behandling med interferon-alfa og ribavirin. Laboratorieindikasjoner for behandling av kronisk viral hepatitt C med interferon alfa er som følger:

• økt transaminaseaktivitet;
• tilstedeværelse av HCV RNA i blodet;
• HCV genotype 1;
• høy viremi i blodet (mer enn 8 × 10 ⁵ kopier/ml).

For tiden er det mulig å kvantitativt bestemme HCV RNA-innholdet i blodserum ved hjelp av PCR-metoden, noe som er av stor betydning for overvåking av interferon alfa-behandling. Vireminivået vurderes som følger: med HCV RNA-innhold fra 102 ^til 104 ^kopier /ml - svakt; fra 105 ^til107 kopier /ml - gjennomsnittlig, over ¹⁰⁸ kopier/ml - høyt. Med effektiv behandling synker vireminivået.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ]