Det forårsakende agens av tularemi

Tularemi er en primær sykdom hos dyr (gnagere), hos mennesker forekommer den som en akutt infeksjonssykdom med et variert klinisk bilde og langsom bedring. Årsaken til tularemi - Francisella tularensis - ble oppdaget av G. McCoy og S. Chapin i 1912 under en epizooti blant jordekorn i området ved Tulare Lake (California), studert i detalj av E. Francis, til hvis ære slekten er oppkalt.

Disse er svært små, 0,2–0,7 µm store, kokkoide eller ellipsoide polymorfe staver, som ofte gir en bipolar farging når spesielle fargemetoder brukes; de er ikke-bevegelige, gramnegative, danner ikke sporer; katalase-negative, danner H2S, strengt aerobe, temperaturoptimum for vekst er 37 °C, pH 6,7–7,2. Virulente stammer har en kapsel, danner syre uten gass under fermentering av noen karbohydrater (glukose, maltose, mannose, fruktose, dekstrin), fermenteringsgraden varierer mellom stammer, innholdet av G + C i DNA er 33–36 mol%. F. tularensis vokser ikke på vanlige medier. G. McCoy og Sh. Chapin brukte et koagulert eggeplommemedium. På det vokser tularemibasillen i form av delikate små kolonier som ligner duggdråper, deretter får kulturen karakteren av et delikat shagreen-belegg med en svakt uttrykt slimete konsistens. E. Francis foreslo næringsagar for dyrking av tularemi-basillen, som inneholdt 0,05–0,1 % cystin, 1 % glukose og 5–10 % blod. På et slikt medium er veksten frodigere og grovere: koloniene er runde med en glatt overflate, melkeaktige i fargen, fuktige, med en slimete konsistens, omgitt av en karakteristisk grønn glorie. Veksten er langsom, koloniene når sin maksimale størrelse på den 3–5. dagen (1–4 mm). Tularemi-bakterier formerer seg godt i plommesekken til et kyllingembryo, og forårsaker dets død på den 3–4. dagen.

Følgende aminosyrer er nødvendige for veksten av F. tularensis: arginin, leucin, isoleucin, lysin, metionin, prolin, treonin, histidin, valin, cystin, for noen underarter - serin, tyrosin, asparaginsyre; i tillegg trenger de også pantotensyre, tiamin og Mg2-ioner for vekst. Med tanke på disse egenskapene kan syntetiske medier brukes til dyrking av F. tularensis.

Slekten Francisella tilhører klassen Gammaproteobacteria, rekken Proteobacteria. Denne slekten inkluderer også F. novicida, hvis patogenitet for mennesker ikke er fastslått.

Den forårsakende agensen for tularemi er en intracellulær parasitt. Virulensen skyldes en kapsel som hemmer fagocytose; neuraminidase, som fremmer adhesjon; endotoksin; allergifremkallende egenskaper i celleveggen, samt evnen til å reprodusere seg i fagocytter og undertrykke deres drepende effekt. Mekanismene for virulens er ennå ikke dechiffrert. I tillegg har man funnet reseptorer i tularemibasillen som er i stand til å interagere med Fc-fragmenter av IgG-immunoglobuliner. Som et resultat av slik binding forstyrres aktiviteten til komplementsystemene og makrofagene.

F. tularensis i S-form (virulent) har to antigener - O og Vi (kapselantigen). O-antigenet er beslektet med antigenene til Brucella. Dissosiasjon S->SR->R fører til tap av kapsel, virulens og immunogenisitet. Arten F. tularensis er delt inn i tre geografiske raser (underarter):

• Holarktisk (lavpatogen for tamkaniner, fermenterer ikke glyserol og har ikke enzymet citrullinureidase, som finnes i land på den nordlige halvkule);
• Sentralasiatisk (lavpatogen for kaniner, har citrullinureidase og fermenterer glyserol);
• Nearctic (amerikansk), mer patogen for kaniner, fermenterer glyserol, har citrullinureidase.

I tillegg har stammer av den amerikanske og sentralasiatiske underarten fosfataseaktivitet, som er fraværende i stammer av den holarktiske underarten.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ]

Resistens hos det forårsakende agensen til tularemi

F. tularensis er ganske stabil i det ytre miljøet, spesielt hvis den finnes i patologisk materiale. I fôr, korn, forurenset med ekskrementer fra syke gnagere, overlever den opptil 4 måneder; i vann - opptil 3 måneder; i is - mer enn 1 måned. Den er følsom for direkte sollys (dør på 30 minutter), høy temperatur (ved 60 °C dør den på 10 minutter), og under påvirkning av 3 % lysolløsning, 50 % alkohol, formalin og andre antiseptiske midler dør den på 5–10 minutter.

Epidemiologi av tularemi

Hovedkilden til tularemi i naturen er gnagere, og blant disse observeres epizootier under naturlige forhold. Mennesker blir bare smittet fra dyr; patogenet overføres ikke fra person til person. Patogenet er funnet hos 82 arter av gnagere og haredyr, og finnes oftest hos representanter for fire familier: muselignende gnagere (Muridae), harer (Leporidae), ekorn (Sciuridae) og jerboer (Dipodidae). I Russland er de viktigste bærerne av muselignende gnagere: vannrotter, markmus, husmus og bisamrotter.

I henhold til deres følsomhet for tularemi kan dyr deles inn i fire grupper:

• Gruppe 1 – de mest mottakelige (markmus, vannrotter, husmus, hvite mus, marsvin og noen andre). Minste dødelige dose er én mikrobiell celle;
• 2. gruppe - mindre følsom (grå rotter, jordrotter, etc.). Den minste dødelige dosen er 1 milliard mikrobielle celler, men én mikrobiell celle er nok til å infisere noen av dem;
• 3. gruppe (rovdyr - katter, rever, ildere). Sykdommen er resistent mot høye smittsomme doser og fortsetter uten synlige manifestasjoner;
• Gruppe 4 - immun mot tularemi (hovdyr, kaldblodige dyr, fugler).

For mennesker er den minste smittsomme dosen én mikrobiell celle. Mennesker kan bli smittet på alle mulige måter: direkte og indirekte kontakt med syke gnagere, deres lik eller gjenstander infisert med gnagere; fordøyelsessystemet (ved å konsumere mat og vann infisert med gnagere), luftbårent støv og overføring. Infeksjon med tularemibakterier er fastslått hos 77 arter av blodsugende leddyr. Av spesiell betydning er ixodide flått, der patogenet vedvarer gjennom hele livet og til og med overføres transovarialt til avkom. Disse omstendighetene bidrar til etablering av sykdommen i naturen. Mennesker blir smittet med flått ikke ved bitt, men som et resultat av at patogenet kommer på huden sammen med flåttens avføring.

I Russland finnes det 7 hovedlandskapstyper med naturlige foci av tularemi: myr, eng, steppe, skog, bekk ved foten av åsen, tundra og tugai (ørken).

[ 7 ], [ 8 ], [ 9 ], [ 10 ]

Symptomer på tularemi

Det forårsakende agenset for tularemi trenger inn i kroppen gjennom det ytre laget (skadet og intakt hud og slimhinner). Sår dannes ofte på penetrasjonsstedet. Gjennom lymfekarene kommer bakteriene inn i den regionale lymfeknuten og formerer seg fritt i den; den inflammatoriske prosessen fører til dannelsen av en bubo. Herfra trenger patogenet inn i blodet, bakteriemi forårsaker generalisering av prosessen, forskjellige organer og vev er involvert i den, spredning av bakterier som fører til dannelse av granulomer og nekrotiske sår. Allergisk omstrukturering av kroppen er assosiert med bakteriemi og generalisering. Inkubasjonsperioden for tularemi varierer fra 2 til 8 dager. Sykdommen begynner akutt: feber, hodepine, muskelsmerter, ansiktshyperemi oppstår. Det videre forløpet avhenger av stedet for inngangsporten, i henhold til hvilken følgende kliniske former for tularemi skilles ut: ulcerøs-glandulær (bubonisk), okulær-glandulær, anginal-glandulær, abdominal og pulmonal. Dødeligheten ved tularemi overstiger ikke 1-2%.

Postinfeksiøs immunitet er sterk, vedvarende, i de fleste tilfeller livslang, har en cellulær natur, er hovedsakelig forårsaket av T-lymfocytter og makrofager, i mindre grad - antistoffer. Fagocytose hos individer med immunitet er fullstendig.

Laboratoriediagnostikk av tularemi

Alle mikrobiologiske metoder brukes til å diagnostisere tularemi. Studien utføres i sikre laboratorier. Materialet til studien - blod, bubopunktur, magesårskraping, konjunktivalutflod, faryngeal plakk, sputum, etc. - bestemmes av sykdommens kliniske form. I tillegg kan vann og matvarer tas med til studien. I naturlige foci av tularemi utføres planlagte systematiske studier for å isolere det forårsakende agenset til tularemi fra gnagere.

Den bakteriologiske metoden for å diagnostisere tularemi hos mennesker gir sjelden positive resultater. En renkultur isoleres vanligvis etter akkumulering på mottakelige forsøksdyr. Hvite mus og marsvin brukes til bioanalyser. Mus infiseres subkutant, marsvin - intraperitonealt; dyrene dør på 3.-6. dag, noen ganger etter rimfrost. Infiserte dyr holdes under spesielle forhold (som ved diagnostisering av pest) og observeres i 6-14 dager. Geler av forsøksdyr dør ikke på 7-15 dager, de slaktes på 15.-20. dag, og likene obduseres. Ved tularemi oppdages patologiske og anatomiske forandringer i form av en produktiv prosess med nekrose. En renkultur isoleres fra indre organer på et eggeplommemedium, glukose-cystein blodfokus, etc. Identifikasjonen er basert på patogenets morfologi og tinktorielle egenskaper, fravær av vekst på MPA og agglutinasjon med homologt serum. Patogenitet for hvite mus og marsvin. En renkultur kan isoleres ved å infisere 12 dager gamle kyllingembryoer og plommesekken. For å isolere en renkultur av patogenet fra vann, sentrifugeres eller filtreres den gjennom bakteriefiltre, og sedimentet brukes til å infisere forsøksdyr. Når man studerer matvarer, vaskes de med MP B, sentrifugeres, og sedimentet brukes til å infisere forsøksdyr.

Samtidig med den bakteriologiske undersøkelsen fremstilles utstryk fra materialet som studeres og farges i henhold til Romanovsky-Giemsa. I utstryk fra organer kan små kokkoide og stavformede bakterier oppdages, som er lokalisert intracellulært og i form av klynger, og danner en delikat kapsel.

For diagnostikk brukes en detaljert agglutinasjonsreaksjon, RPGA og RIF.

Allergiske tester brukes til tidlig diagnostikk av tularemi (fra den 5. dagen etter sykdomsdebut). To typer tularin brukes, og følgelig brukes to metoder for administrering: kutan og intradermal. Siden konsentrasjonen av allergenet i begge typer tularin er forskjellig, er det uakseptabelt å bruke kutan tularin til en intradermal test og omvendt. Resultatene av den allergiske reaksjonen tas dynamisk i betraktning etter 24, 36, 48 timer. Et infiltrat med en diameter på minst 5 mm regnes som et positivt resultat. Hos vaksinerte personer eller de som har hatt tularemi, forblir allergiske tester positive i en årrekke (anamnesisk reaksjon).

Spesifikk forebygging av tularemi

For spesifikk forebygging brukes en vaksine mot tularemi, innhentet i 1930 av de russiske militærlegene B. Ya. Elbert og N.A. Gaisky fra Me 15-stammen. Vaksinen gir sterk immunitet i 5–6 år ved infeksjon med den europeiske og holarktiske underarten og er effektiv mot den amerikanske varianten av patogenet. Vaksinasjon utføres i henhold til epidemiologiske indikasjoner, samt for personer som tilhører risikogrupper. Samtidig vaksinasjon mot tularemi og brucellose; tularemi og pest, samt mot tularemi og noen andre infeksjoner er tillatt.

Uspesifikk forebygging av tularemi er den samme som for andre zoonoser og er primært rettet mot å kontrollere gnagere.