Dermal ekvivalens. Opprinnelseshistorie og resultater fra kliniske studier

På slutten av 1980-tallet ble en flytende form av bovint kollagen utviklet ved Stanford University, som omdannet seg til et mykt, elastisk substrat ved kroppstemperatur. Legemidlet ble registrert og godkjent for bruk i en rekke europeiske land som et implanterbart middel kalt Zyderm Collagen Implantant. Dette legemidlet ble det første implantatet. Senere dukket det opp andre midler for konturplastikk, som Restylane, Perlane, Pharmacrylic gel, Artecol, Biopolymer gel og andre. Disse legemidlene begynte å bli brukt ikke bare til konturmodellering og korrigering av aldersrelaterte hudforandringer, men også til behandling, eller mer presist, for å glatte ut lindring av arr. Alle ble injisert under bunnen av arret.

Søket etter mer avanserte metoder for behandling av hypotrofiske arr førte oss til ideen om å bruke en kunstig laget analog av hud til dette formålet - "dermal ekvivalent" (DE), som også brukte flytende kollagen. Det fantes mange alternativer for kunstige huderstatninger, men den generelle ideen var å lage et hudlignende vev fra de strukturelle komponentene i dermis, som ikke ville bli avstøtt ved transplantasjoner og ville være et godt substrat for innvekst av dermis og epidermis egne komponenter. Det er kjent at de viktigste strukturelle komponentene i dermis er cellulære, fiberholdige elementer og interstitiell substans. Fiberholdige elementer er hovedsakelig representert av kollagen- og elastinfibre, den interstitielle substansen - glykoproteiner, proteoglykaner og glykosaminoglykaner. Det viktigste funksjonelle cellulære elementet i dermis er fibroblasten, den cellulære populasjonen av fibroblaster er kilden til dannelsen av nesten alle strukturelle komponenter i dermis. Derfor, når man lager en "huderstatning", bruker de fleste forskere et kollagensubstrat blandet med fibroblaster og glykosaminoglykaner. Et lag med keratinocytter påføres på toppen i en eller annen form for å skape et heldekkende hudlag og raskere gjenoppretting av levedyktigheten til den transplanterte hudekvivalenten, noe som muliggjøres av en rekke vekstfaktorer som skilles ut av keratinocytter. En av de første versjonene av en "levende hudekvivalent" ble foreslått i 1983 av E. Bell et al. Hudfibroblaster ble blandet med kollagen, plasma og vekstmedium, noe som førte til dannelsen av en gel, på hvilken overflate keratinocytter ble dyrket. Alt dette ble dyrket i 1-2 uker i vilro, hvoretter den dermale ekvivalenten ble ansett som moden og representerte et levedyktig vev i form av en gjennomskinnelig elastisk masse. Forfatterne foreslo å overføre den til såroverflatene til brannskadepasienter for å gjenskape en heldekkende hudstruktur. Noen forfattere brukte en kollagensvamp eller kollagenmatrise dekket med proteoglykaner og befolket med fibroblaster som grunnlag for den dermale ekvivalenten, på hvilken autologe keratinocytter ble dyrket. Som et resultat ble en såkalt tredimensjonal modell av huden laget. For dyrking av keratinocytter med det formål å overføre dem til såroverflater, brukte noen forfattere også en kunstig matrise av kollagen, glykosaminoglykaner og kitosan, hud fra kadavere og grisehud som substrat. Etter 7–14 dager fra starten av dyrkingen ble et fulllagstransplantat som inneholdt dermis og epidermis transplantert på sårene til pasienter eller dyr.

Kunstig huderstatning har ikke bare blitt brukt til å restaurere huden hos brannofre, men også til å teste legemidler for cytotoksisitet og for å studere vekstfaktorer in vitro.

Utilstrekkelig effektivitet, fra vårt synspunkt, av kirurgisk dermabrasjon av dype hypotrofiske arr i kombinasjon med transplantasjon av MPC ga grunn til å forsøke å utjevne hudavlastningen ved å inokulere en analog av den dermale ekvivalenten i fordypningen i det hypotrofiske arret. Flytende kollagen oppnådd i laboratoriet, hvori en suspensjon av fibroblaster ble introdusert, ble substratet for å lage den dermale ekvivalenten. Den dermale ekvivalenten, så vel som MPC, ble laget i et spesialisert laboratorium sertifisert for denne typen aktivitet, og på operasjonsdagen og -timen ble den levert i en glassflaske i en beholder med is til klinikken.

Operativ arrpolering ble utført med standardteknikk etter antiseptisk behandling av huden og lokalbedøvelse med 2 % lidokain, novokain eller ultrakain. Poleringen glattet ut arroverflaten og skapte samtidig forhold for innpoding av dyrkede celler eller cellesammensetninger. Deretter ble den avkjølte flytende kollagengelen med fibroblaster inokulert i den påført med en steril spatel på den polerte overflaten av hypotrofiske arr (i arrets fordypning), hvor den polymeriserte under påvirkning av kroppstemperatur.

Som et resultat polymeriserte kollagenet med fibroblaster seg fra flytende tilstand til tykk gelform etter 5–10 minutter. Etter at DE-en tyknet, ble en bandasje med en suspensjon eller MPC på et substrat påført oppå.

En steril flerlagsbandasje ble festet som ved MPC-transplantasjon. Avhengig av arroverflaten, sårbelegget som keratinocyttene var lokalisert på og typen sliping, ble bandasjen avstøtt innen 7 til 12 dager.

Metoden for kombinert behandling av hypotrofiske arr ved bruk av kirurgisk dermabrasjon med påfølgende transplantasjon av "dermale ekvivalenter" og keratinocytter i form av et flerlagslag dyrket på spesielle sårbandasjer eller i form av en suspensjon i arrfordypningen, gjør det mulig å oppnå betydelig bedre, kosmetisk akseptable resultater med reduksjon eller fullstendig forsvinning av (-) vev. Dermale ekvivalenter danner pasientens eget vev (dermis), arrvevet forblir under det nydannede vevet. MPC skaper en epidermis med normal tykkelse og funksjonell aktivitet, noe som gjør at arrets generelle utseende har en tendens til å forbedres betydelig over flere måneder.

Denne taktikken for behandling av hypotrofiske arr kan kalles optimal for å løse dette problemet i dag. Imidlertid er DE-varianten vi brukte i form av en kollagengel med fibroblaster inokulert i den ikke veldig praktisk å jobbe med. DE for arbeid med hypotrofiske arr bør i utgangspunktet være tykkere slik at den kan plasseres i arrhulen, fordeles i den, og deretter påføres et sårbelegg med keratinocytter oppå. Dermed kan vi si at denne retningen i arbeid med hypotrofiske arr bare er skissert, men prognosene for videre utvikling og studier er svært optimistiske.

Kompleksiteten og de høye kostnadene ved å skaffe flerlags keratinocyttlag som et terapeutisk materiale stimulerte behovet for å søke etter andre alternativer for cellesammensetninger. Av stor interesse for forskere er dyrking av fibroblaster, som, når de transplanteres på såroverflater, gir en effekt som på mange måter ligner på resultatene av keratinocytttransplantasjon, men er et mye enklere og billigere cellulært materiale. I våre studier behandlet vi flere pasienter med hypotrofiske arr med mesoterapeutisk injeksjon av fibroblastsuspensjon under arrene.

En suspensjon av fibroblaster i et vekstmedium med 1,5–2 millioner celler per 1 ml ble introdusert under arrene ved hjelp av mesoterapeutiske teknikker (mikropapulær, infiltrativ). Antall behandlinger var fra 4 til 10, avhengig av arrets alder, pasientens alder og defektens dybde. Intervallet mellom behandlingene var 7–10 dager. Som regel ble introduksjonen av en suspensjon av autologe og allogene fibroblaster ledsaget av en mindre, forbigående vaskulær reaksjon.

Som et resultat av kliniske studier ble det avslørt at under påvirkning av transplanterte MPC-er reduseres varigheten av den inflammatoriske reaksjonen i huden og arrene etter kirurgisk dermabrasjon, og epiteliseringen av såroverflater akselereres med gjennomsnittlig 3–4 dager.

Når man arbeider med normotrofiske og hypertrofiske arr, er det av største betydning å akselerere helbredelsen av postoperative erosjoner, siden det er her muligheten for å oppnå en optimal terapeutisk effekt ligger.

Transplantasjon av den dermale ekvivalenten førte til fylling (-) av vevet i hypotrofiske arr, utjevning av relieffet og utjevning med den omkringliggende huden, noe som gjorde at arrområdet ble betydelig mindre.

Innføringen av en fibroblastsuspensjon i hypotrofiske arr førte også til en utjevning av hudavlastningen og en reduksjon i arrområdet.

I alle tilfeller av celletransplantasjon ble det observert en ettervirkning, der det i løpet av flere måneder var en forbedring av arrenes estetiske utseende, som hadde en tendens til å omdannes til en dermallignende struktur.

Alle effektene vi observerte er relatert til implementeringen av det biostimulerende potensialet til de transplanterte cellene. Det ser ut til at antallet cellelag i transplantatene vanligvis er 10–30 % høyere. Følgelig er det totale cellepotensialet per arealenhet allerede 10–30 % høyere enn normalt. I tillegg ble de beste resultatene ved transplantasjon av keratinocytter og fibroblaster oppnådd ved transplantasjon av cellemateriale fra unge, friske mennesker. Dette faktum taler for øvrig for å bruke en allogen kultur hentet fra unge og friske donorer. Det bioenergetiske og informasjonsmessige potensialet til en slik kultur overføres til mottakerens egne celler, noen ganger ikke veldig unge, noe som forbedrer "kvaliteten" på mottakerens egne vev og celler.

Dermed tillater bruk av keratinocytt- og fibroblastkultur:

• Akselererer epiteliseringen av arr etter dermabrasjon.
• Reduser synligheten av arr ikke bare ved å jevne overflaten med overflaten av den omkringliggende huden, men også ved å danne en fullverdig epidermis over dem.
• Forbedrer resultatene av kirurgisk dermabrasjon på grunn av effekten av cytokiner fra transplanterte celler på arret, som til slutt har en tendens til å omdannes til en dermallignende struktur.
• For å oppnå estetisk betydelig mer akseptable resultater ved behandling av pasienter med normotrofiske, hypotrofiske, hypertrofiske og atrofiske arr og striae.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ], [ 10 ], [ 11 ]